两种外周血单个核细胞采集方法体外诱导CIK细胞的比较_苏晓三.pdf

昆明医科大学学报 2013 ，（6）：107～ 111 CN 53 - 1221/ R Journal of Kunming Medical University 两种外周血单个核细胞采集方法体外诱导CIK 细胞的比较 1） 2） 1） 3） 1） 1） 苏晓三 ，汪 珺 ，张 蕾 ，金良昆 ，陈 睿 ，王翼寅 （1）昆明医科大学附属甘美医院生物医学实验中心，云南昆明 650011；2）昆明医科大学第一附属医院 麻醉科，云南昆明 650032；3）昆明医科大学附属甘美医院肿瘤科，云南昆明 650011） ［摘要］目的 比较两种外周血单个核细胞（peripheralbloodmononuclearcells，PBMCs）采集方法诱导的细胞 因子诱导杀伤细胞（cytokine-inducedkiller，CIK）扩增效率、细胞表型、杀伤肿瘤细胞的活性及其回输至肿瘤患 者体内的免疫调节作用．方法 12例肿瘤患者共进行36次CIK细胞体外诱导、扩增，其中6例患者共18次扩增 采用血细胞分离机采集PBMCs，另外6例患者共 18次培养采用Ficoll密度梯度分离 50mL外周血方法采集 PBMCs．结果 采用血细胞分离机或Ficoll分离法采集PBMCs经体外诱导获得CIK（分别为A-CIK和F-CIK）细 9 9 9 9 胞数分别为7.47×10（3.7-13.6×10）和6.37×10（3.8-11.8×10） ．培养至14d时，90%的A-CIK和F-CIK + + + + 细胞表型为CD3，其中CD3CD56，NKG2D细胞及细胞内TH1细胞因子均显著升高．效靶比为60:1时，A-CIK 和F-CIK细胞对Daudi、K562及293的杀伤活性分别为（49.1±17.8）%和（55.3±11.5）%、 （67.6±24.1）%和 （58.1±17.6）%、 （36.4±11）%和（33.7±14.8）%．给肿瘤患者回输自体A-CIK或F-CIK细胞 14d后，外周 + + + + 血中CD3、CD8及CD3、CD56细胞以及PBMCs内IFN-γ 均显著升高．结论 采集肿瘤患者50mL外周血分 离的PBMCs足以制备临床治疗使用的CIK细胞． ［关键词］免疫疗法；过继；细胞分离；肿瘤；体外 ［中图分类号］R735.37［文献标识码］A ［文章编号］2095－610X（2013）06－0107－05 Comparison of CI K Cells I nduced in Vit ro from Two Different Peripheral Blood Mononuclear Cells Collect ing Met hods 1） 2） 1） 3） 1） 1） SUXiao－san，WANGJun，ZHANGLei，JINLiang－kun，CHENRui，WANGYi－yin （1）Biomedical Research Center ，The Affiliated Calmette Hospital of Kunming Medical University ，Kunming Yunnan 650011；2）Dept. of Anesthesiology ，The 1st Affiliated Hospital of Kunming Medical University ， Kunming Yunnan 650032；3）Dept. of Oncology ，The Affiliated Calmette Hospital of Kunming Medical