HIV初筛实验室样品采集和处理程序.docVIP

南宁市红十字会医院检验科 HIV筛查实验室 文件编号： 第1页 共3页 HIV筛查实验室样品采集和处理程序 2011年10月版第0次修订 实施日期：2011年10月18日 1 范围 本文件规定了用于人免疫缺陷病毒（HIV）检测的全血、血清、血浆、细胞样品的采集和处理方法，适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、耐药检测,CD4+和CD8+T淋巴细胞测定和HIV分离培养。 2 样品种类及相应的用途 全血、血清、血浆样品可用于HIV抗体检测。 抗凝全血可用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定。 血浆可用于HIV-1病毒载量、基因型及耐药检测。 全血、血浆样品可用于HIV核酸的定性检测。 全血可用于HIV-1分离培养。 3 操作步骤 3.1 采样前准备 根据检测项目的具体要求，确定采集样品的种类、处理、保存及运输的时限和方法，按照临床采血技术规范的要求操作，遵守生物安全要求。 要检查所需物品是否已备齐，是否在有效期内，有无破损，是否足量，特别应检查受检者信息与样品容器表面的标记是否一致，并注明样品采集时间。选择合适的室内（外）采血空间，受检者坐（卧）于合适的位置，准备采血用具、皮肤消毒用品、采血管及试管架、硬质废弃物容器等。 采血前，先对装有样品的离心管或滤纸进行标记，标记的内容至少应包括： 患者姓名、送检科室、床号 3.2 样本采集和处理 抗凝全血：消毒局部皮肤，用加有抗凝剂（EDTA钠盐或钾盐、枸橼酸钠、肝素钠）的真空采血管抽取适量静脉血，或用一次性注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管中，轻轻颠倒混匀6～8次，备用。 末梢全血：消毒局部皮肤（成人和1岁以上儿童可选择耳垂、中指、无名指。1岁以下儿童采用足跟部）。用采血针刺破皮肤，用无菌纱布擦掉第一滴血。收集滴出的血液，备用。 血浆：将采集的抗凝全血1500～3000r/min离心15min，上层即为血浆，吸出置于合适的容器中，备用。 血清：根据需要，用一次性注射器（或真空采血管）抽取5～10ml静脉血，室温下自然放 南宁市红十字会医院检验科 HIV筛查实验室 文件编号： 第2页 共3页 HIV筛查实验室样品采集和处理程序 2011年10月版第0次修订 实施日期：2011年10月18日 置1～2h，待血液凝固、血块收缩后再用1500～3000r/min离心15min，吸出血清，置于合适的容器中，备用。 根据检测要求选用适当的抗凝剂，如CD4+和CD8+T淋巴细胞测定可选用EDTA钠盐或钾盐、枸橼酸钠、肝素钠，HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用EDTA钠盐或钾盐或枸橼酸钠。 采血完成后的穿刺针头必须丢弃于尖锐危险品容器里，妥善处理，防止发生职业暴露。 样品采集后处理、保存、运输的时限和条件，因不同的检测项目而异，应参见不同检测项目要求。 采样之后，应及时在登记本上作记录，记录的内容至少包括： 患者姓名、性别、年龄、送检科室、床号、送检项目、标本类别、采集时间、采集者 3.3 样品的保存 用于抗体和抗原检测的血清或血浆样品，短期（1周）内进行检测的可存放于2～8℃， 一周以上应存放于-20℃以下。 用于核酸检测的血浆和血细胞样品4天内进行检测的可存放于4℃，3个月以内应存放于-20℃以下。3个月以上应置于-70℃以下。 艾滋病检测筛查实验室检测的筛查阳性样品应及时送确证实验室，筛查阴性样品，可根据具体需要决定保存时间，一般实验室保存期为7天。特殊用途或专项项目的样品根据具体要求确定保存时间。 3.4 样品的运送 应符合生物安全要求；要获得相应部门批准并由具有资质的人员专程护送。 应采用三层容器对样品进行包装，随样品应附有与样品唯一性编码相对应的送检单。送检单应标明受检者姓名、样品种类等信息，并应放置在第二层和第三层容器之间。 第一层容器：直接装样品，应防渗漏。样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的唯一性编码或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。 第二层容器：容纳并保护第一层容器，可以装若干个第一层容器。要求不易破碎、带盖、防渗漏、容器的材料要易于消毒处理。 第三层容器：容纳并保护第二层容器的运输用外层包装箱。外面要贴上醒目的标签，注明数量、收样和发件人及联系方式，同时要注明“小心轻放、防止日晒、小心水浸、防止重压”等字样，还应易于消毒。 南宁市红十字会医院检验科 HIV筛查实验室 文件编号： 第3页 共3页 HIV筛查实验室样品采集和处理程序 2011年10月版第0次修订 实施日期：2011年10月18日 用于抗体检测的血清和血浆样品应在冻存条件下运送。用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定的样品应在室温下（18～25℃）或4℃（特殊要求时）运送。用于病毒载量检测的样品应