基于多孔硅Bragg反射镜的光学免疫检测方法.pdfVIP

V01．30 高等 学校 化 学 学报 No．12 2009年 l2月 CHEM1CALJOURNALOFCHINESEUNIVERSITIES 2381～2386 基于多孔硅 Bragg反射镜的 光学免疫检测方法 吕小毅 ，庆格乐图 ，向 梅 ，贾振红 ，李 锐 ，钟福如。，李江伟 ，张富春 (1．西安交通大学电子与信息工程学院，西安710049； 2．新疆大学生命科学与技术学院，新疆生物资源基因工程重点实验室，3．化学化工学院， 4．信息科学与工程学院，5．物理科学与技术学院，乌鲁木齐830046) 摘要 通过共价固定方法将羟基红花黄色素A(HSYA)抗血清蛋白固定到多孔硅Bragg反射镜的孔洞中，定 量分析了不同浓度的羟基红花黄色素A人工抗原与特异性抗羟A多克隆抗体反应后多孔硅Bragg反射镜的 反射谱峰位的红移情况．对比研究了固定阴性血清蛋白的多孔硅Bragg反射镜基底在加入抗原后的反射谱峰 位变化情况，结果表明，基于多孔硅Bragg反射镜的光学免疫检测具有很好的特异性，且同目前普遍使用的 ELISA方法相比，具有免标记且检测时间短等优异性能，同时该研究也为开发红花成分快速检测的免标记多 孔硅生物传感器奠定了基础． 关键词 多孔硅Bragg反射镜；光学检测；羟基红花黄色素A；反射光谱 中图分类号 0657；O621 文献标识码 A 文章编号 0251-0790(2009)12-2381-06 羟基红花黄色素A(HydroxysaffloryeHowA，HSYA，简称羟A)是中草药红花的主要药理物质，具 有良好的抗脑缺血及神经细胞保护作用，羟A含量的高低是评价红花药材质量及相应中药制剂质量的 主要指标．因此，探索快速准确测定羟A类小分子有效药用成分的检测方法具有重要的现实意义．目 前，对该成分的定量分析主要采用高效液相色谱法．该方法存在重复性差、检测步骤多和需要专用设 备等缺陷，无法作为一种简便易行的常规分析手段应用到生产和临床实践中．因此，利用特异性强、 灵敏度高且成本低的免疫分析方法…来检测红花主要成分羟A的含量具有广阔的应用前景．目前最为 常用的免疫检测方法是酶联免疫吸附分析方法(Enzyme．1inkedimmunosorbentassay，ELISA)，但其存在 需要标记且检测时问较长等缺陷． 多孔硅材料具有独特的多孔结构和非常大的内表面积，并且具有能在室温下发光、造价低廉且能 和现有集成电路完全兼容等特点，是一种理想的免疫传感器基底材料 ；而光子带隙结构传感器具 有灵敏度高、响应快、实时性好、免标记、可遥控、结构紧凑、无电磁干扰和安全性高等特点．因此， 基于多孔硅的一维光子带隙结构生物传感器兼具多孔硅和光子带隙结构传感器的优异性能 ’，而由 高、低两种不同孔隙率的多孔硅层以ABAB…的方式周期交替排列构成的多孔硅Bragg反射镜就是一 种制备较为简单的多孔硅光子带隙结构传感器． 本文在已成功合成羟A人工抗原并获得特异性抗羟A抗血清以及定性研究单层多孔硅免疫传感 器工作的基础上 ，将多孔硅Bragg反射镜的反射光谱分析技术应用于羟A的免疫分析检测研究中， 分别以抗羟A多克隆抗体和羟A人工抗原作为试验探针分子和 目标分子，首先将抗羟A多克隆抗体 通过硅烷化和戊二醛交联技术固定到多孔硅Bragg反射镜的孑L洞中，然后定量分析了加入不同浓度羟 A人工抗原后，多孑L硅Bragg反射镜的反射光谱在抗原抗体反应前后的变化．与ELISA方法相比较， 基于多孔硅Bragg反射镜反射光谱分析技术的免疫检测方法不但无需任何标记，而且检测时间也缩短 收稿 日期：2009-06-22． 基金项 目：国家自然科学基金 (批准号、教育部新世纪优秀人才支持计划 (批准号：NCET-05-0897)和新疆维吾尔自治 区高校科学研究计划(批准号：XJEDU2006110)资助． 联系人简介：贾振红，男，博士，教授，博士生导师，主要从事光电器件研究．E-mail：jzhh@xju．edu．3(11 2382