HCO3 - 高亲和转运蛋白操纵子基因在聚球藻7942 CO2浓缩机制中功能的研究.pdf

第! 卷# 增刊# # # # # # # # # # # 厦门大学学报（自然科学版）# # # # # # # # # # # # !#$ !# %’$ $%% 年 月# # # # # # # # # # ()*+# , -.+/0* 1*.20)3.45 （6+4)+# %7.0*70 ）# # # # # # # # # # 8+5 $%% :; - 高亲和转运蛋白操纵子基因在聚球藻+,!$ ) ;$ 浓缩机制中功能的研究 陈金灶，张# 平，邬小兵，徐惠娟，纪小苹，龙敏南! （厦门大学生命科学学院生物能源中心，福建 厦门 )(%% ） 摘要： - 蓝藻!#$%’%’%%() =6 ?;;+,!$ :;) 高亲和转运蛋白操纵子基因%*+,-./ 是其;$ 浓缩机制中的调控基因之 一6 本研究用携带潮霉素 @ 磷酸转移酶基因（AB1C/2B9D0 @ A/ ECF0=G7CF=7 ，+ 0 ）筛选标记的同源双臂整合载体 H;’ :*I: 转化蓝藻!#$%’%’%%() =6 ?;;+,!$ ，以潮霉素@ 作为筛选试剂筛选出具潮霉素@ 抗性的转化藻，运用引物?;J 方法证实潮霉素@ 磷酸转移酶基因表达盒通过质粒H;’:*I: 的介导已定点插入蓝藻 !#$%’%’%%() =6 ?;;+,!$ 基因 组中，成功地构建了具有潮霉素@ 抗性的%*+-./ 基因插入失活突变藻株6 并最终通过比较野生藻!#$%’%’%%() =6 ?;;+,!$ 和突变藻!#$%’%’%%() =6 ?;;+,!$ 在不同KF ; 浓度的改良@L’(( 培养基中生长特性，探讨了:; - 高亲 $ ) ) 和转运蛋白操纵子%*+,-./ 基因失活对藻体生长的影响6 关键词： !#$%’%’%%() =6 ?;;+,!$ ；;$ 浓缩机制；插入失活 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： M ,)# # # # # # *# # # # # # %!)N’%!+,（$%% ）O’%%$+’% # # 蓝藻是一类能进行类似于植物光合作用的自养原 有潮霉素@ 抗性的!#$%’%’%%() =6 ?;;+,!$ %*+ -9 核生物6 几亿年的生命进程中，蓝藻以及其它的光合自 ./ 基因插入失活突变藻株，并在突变藻株生长特性 养微生物形成;$ 浓缩机制（;$ 9/0970ECFED01 279AF’ 改变的研究基础上，探讨了以%*+ -./ 基因作为外源 ［(］ 基因整合位点的可行性，同时验证蓝藻基因工程中以 0D=2 ;;P ） ，以此适应于大气中$ 比例上升而;$ 比例逐步下降这一生境的演变，提高胞内对;$ 亲和 潮霉素抗性基因作为筛选标记的可行性，为蓝藻光解 性相对较低的核酮糖’(，’二磷酸羧化酶（J5QD=9/ ）活 水制氢系统研究的进一步开展奠定基础6 性中心周围;$ 浓度，从而保证光合作用的顺利进 ［$ ］ (# 材料与方法 行 6 随着蓝藻基因工程的开展，在基因工程技术的 深入运用下蓝藻体内;$ 浓缩机制中相应的;D 吸收 (6 (# 材料和试剂 、转运以及在蓝藻体内的转化机制已逐步阐明［) ］6 随 藻种：!#$%’%’%%() =6 ?;;+,!$ 由厦门大学生 后PFCD OADQFEF 等研究了!#$%’%)0