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HPV-16-11 L1双价重组杆状病毒的构建及VLP形成.pdf
JMicrobiol 2006,Vol26,No.9 ·771·
空堡丝生塑堂塑鱼瘗堂盘查2丛生2旦筮堑鲞箜2塑Chin Immunol,September
.病毒学.
HPV一16—11
L1双价重组杆状病毒的
构建及VLP形成
庄敏 谷鸿喜 李迪 崔洪波 刘希君 魏兰兰 凌虹
目的将本地区流行株HPV-16L1基因与HPV-11
【摘要】 L1基因双表达于杆状病毒昆虫细
胞表达系统,组装成类病毒颗粒(vir岫like
particles,VLP)。为研制同时预防宫颈癌和尖锐湿疣等多种
疾病的HPV-16-11型基因工程疫苗奠定基础。方法对本地流行株HPV-16L1基因进行亚克隆,构
建pBluescript-HPV-16L1克隆质粒,并对其测序。再将质粒中HPV-16L1基因切下,连接到pFastBacDual
L1切下HPV-11
的强启动子phol后;Jg克隆质粒pSP73.HPV-11L1,连接到pFastBacI)ual的弱启动子p10
to
后,利用BacBac系统在昆虫细胞Sit)中表达外源蛋白。SDS和Westernblot鉴定HPV-16L1和
HPV-ll
L1蛋白的表达量及特异性,电镜观察昆虫细胞内、呻的存在。结果 酶切和PCR法证实
L1.HPV-11
L1转移质粒连接正确,转染昆虫细胞鲫后,检测到HPV-16和HPV-11
pFastBacDual-HPV-16
Ll特异蛋白,两种蛋白的相对分子质量(肘,)相近,约56×103;电镜观察到了vIP。结论本研究利
to
用KaeBae系统构建Bacrllid,ⅢV16.ⅢIv-11L1,转染到Sit)昆虫细胞后重组外源蛋白得到高效表达,
并经电镜证实昆虫细胞内存在较大量ⅥP,用此ⅥP免疫BALB/c小鼠后产生抗L1蛋白的抗体。共
表达HPVL1蛋白可能为预防多型别HPV感染提供新途径。
【关键词】人乳头状瘤病毒16型;人乳头状瘤病毒11型;L1基因;共表达;类病毒颗粒;杆
状病毒
ofHPV二16and-11L1 thebivalentrecombinantandVUPsassembled
using baculovims
Coexpression genes
L1 ZHUANG
3fin,GU Di,CUI
by proteins Hong-xi,1IHong-bo,删xi-jun,腼,Lan-lan,11NGHong.
Medical
D印a,删ofMicrobiology,HarbinUniversity,HarbinJ曳坝晰,优阮
Correspondingauthor:甜Hong-xi,Emad:hxgu2432@163.tom
To
make耶V—16_11bivalent vaccine of}Ⅲv.16and
【Abstract】Objective engineeringcoexpression
.11L1 thebivalentrecombinantbaculovirusandVires-like theL1
using particles(岫)assembledby proteins.
Metlmds皿le HPv-16L1 wassub-clonedand wasconstructedand
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