PCR技术应用五苯酶同尿症诊断.pdfVIP

中国试剂网 3.9.57 PCR 技术应用五：苯酶同尿症诊断 经典型的苯丙酮尿(Phenyketon uria 简 PKU)是由苯丙氨酸羟化酶(PAH)的遗 传性 缺陷引起的一种先天性代谢病，其发病早在我国以为 1/10000 左右，杂合 子频率为 1/50. PKU 的临床表现 PKU 患儿由于苯丙氨酸羟化酶的缺乏或不是使苯丙氨酸在休丙大量堆识， 并经旁 路代谢途径产生一系列的毒性代谢产物而该小儿产生一系列的明显中毒 症状.患儿在 刚出生时，由于无苯丙氨酸的摄入因此无临表现.随着患儿的退食而 连续出现智力进 行性下降，皮肤色素浅，肌张力高，惊厥发生，汗和尿中有特 殊的臭味，最经生活不 能自理，智力严重障碍. PKU 的遗传学 PKU 是一种常染色体隐性遗传病，患儿的父母为致病基因的携带者而患儿 为纯合 子.引起 PKU 的基因的PAH ，该基因位于 12q22-24.2 全长约 90kb，包括 13 个外显子和 12 个内含子. 内切酶解分析显示PAH 的完整cDNA 其有 8 个限制 性内切酶切点，形成 10 个 RFLP.在人群中这些 RFLP 可组成 1536 种单倍型.过 去对 PKU 的诊断即用此连锁分析.另外 在 PAH 基因内含有数个 VNTR 和 STR. 外显子 3 锁 700bp 处有-(TCTA) 重复序列 ，外显子 133 端下游 3kb 内有 -30bpVNTR，它们仍有食杂的遗传病多态现象，可用为连锁分析时 的标记. PAH 基因突变类型 PAH 基因的突变常见的有两种类型即缺失和单碱基置换，在我国人群中， 已检测的 PKU 均因 PAH 基因的单碱基量换所致. 目前在我国其检出了15 种以上 的点突变 6 见表，这 些点突变在我国南方和北方人群中的频率有的不同.因此在 PKU 的诊断中注意这种差别. 中国人已检出的PAH 基因点突变 突变位点代号 所外的外显子 突变性质 E56D 2 G→T R111X 3 C→T 中国试剂网 3.9.57 IVS4nt-1 4 G→A F161S 5 T→C Y204C 6 A→G R243Q 7 G→A G247V 7 G→T L255V 7 T→C R261Q 7 G→A IVS7n ＋2 7 G→T W326X 10 G→A A345T 10 G→A Y356X