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.酶催化反应的动力学
第节 酶反应动力学酶反应动力学研究酶促反应速度影响(哪些因素影响、如何影响)称酶促反应动力学。酶反应动力学、物浓度对反应速度的影响
??? ?当其它条件在最适、不变情况下 ????① [S]较低时,v与S呈正比,即呈直线关系。???? 当[S]增加至一定程度时,v随[S]增加而提高,不呈直线关系。???? [S]再增加,v达到最大V。
???米氏方程
说明:
⑴Vmax为最大反应速度,[S]为底物浓度,KM为米氏常数概念反应速度达到最大反应速度一半时的作用物浓度。是酶的特征性常数,表示酶与作用物的亲和力大小。越大,酶与作用物的亲和力越小。????同工酶的不同。
???米氏方程应用
????酶的鉴定根据相同与否判定是否同一个酶酶的纯化根据稳定与否判定酶是否被纯化?计算欲使反应速度达到某一特定反应速度时的合理[S]Km的意义
⒈ KM值等于酶促反应速度达到一半时的作用物浓度????二、酶浓度对反应速度的影响
述:在酶促反应系统中,当[S]足够大时v∝[E] 。
三、温度对反应速度的影响
?????最适温度一般在3740℃
⑵影响因素:反应时间
⑶相互关系
①酶可以在较短的时间内耐受较高的温度;
相反,延长反应时间,最适温度变降低。
②环境温度高于最适温度时,反应速度则因酶的变性而降低。
③低温能降低酶活性,但一般不破坏酶;
温度回升后,酶又可以恢复活性。
⒊ 临床应用:低温麻醉;低温保存菌种;酶制剂的保存
四、pH对反应速度的影响
述:胃蛋白酶的最适pH1.5,精氨酸酶则为9.0。
⑶相互关系
①溶液的pH值高于或低于最适pH时,酶活性降低;
②远离最适pH时,会导致酶的变性失活。
述:在测定酶的活性时,应选用适宜的缓冲液以保持酶活性
的相对恒定。
?五、抑制剂对反应速度的影响凡能降低酶而本身不引起酶蛋白变性的物质 (一)?不可逆性抑制
????有机磷农药中毒 如 605、敌百虫、DDV等。这类抑制剂与酶活性中心的内、外的必需基团形成牢固不可逆的共价结合。重金属和砷制剂与巯基酶结合,故可用BAL(二巯基丙醇)急救。
可逆性抑制????Ⅲ 种类
⒈ 竞争性抑制
特点:I与S 结构相似,与S竞争结合E的同一部位。??????????? ②抑制程度取决于[I]/[S]值I与E的的亲和力。
动力学特点:V不变,Km增加 非竞争性抑制????⑵特点:I与S结构不相似,结合酶部位与S不同,与酶活性中心外必需基团结合,引起酶构象改变。抑制程度只与[I]有关。
动力学特点:V减小,Km不变???
?六、激剂对酶反应速度的影响
??如金属离子、氯离子等能使酶活性增强??①概念:不存在时,酶仍有一定催化活性的某些激活剂
②举例:Cl-
课外作业:
一、名解:
酶的最适温度 ;酶的最适pH;不可逆性抑制;可逆性抑制;
竞争性抑制
二、简答:
⒈ 分别简述酶浓度和底物浓度对酶促反应速度是如何影响的?
⒉ 什么是米-曼式方程式?什么是米氏常数?
米氏常数的意义是什么?
⒊ 何谓酶的竞争性抑制和非竞争性抑制?试用竞争性抑制的
作用原理阐明磺胺类药物能抑制细菌生长的机理。
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