临二氮菲分光光度法测定微量铁的报告.docVIP

临二氮菲分光光度法测定微量铁的报告 一、 实验目的：1 学习如何选择分光光度分析的条件。2 学习分光光度法测铁的方法。 二、 原理：可见分光光度法测定无机离子，通常要经过两个过程，一是显色过程，二是测量过程。为了使测定结果有较高灵敏度和准确度，必须选择合适的显色条件和测量条件，这些条件主要包括入射波长，显色剂用量，有色溶液稳定性，溶液酸度干扰的排除。（1） 入射光波长：一般情况下，应选择被测物质的最大吸收波长的光为入射光。（2） 显色剂用量：显色剂的合适用量可通过实验确定。（3） 溶液酸度：选择适合的酸度，可以在不同PH缓冲溶液中加入等量的被测离子和显色剂，测其吸光度，作A-PH曲线，由曲线上选择合适的PH范围。（4） 有色配合物的稳定性：有色配合物的颜色应当稳定足够的时间。（5） 干扰的排除：当被测试液中有其他干扰组分共存时，必须争取一定的措施排除干扰。邻二氮菲与Fe2+ 在PH2.0-9.0溶液中形成稳定橙红色配合物。配合的ε =1.1 ×104 L? mol ?cm-1 PH为2-9（一般维持在PH5-6）之间在还原剂存在下，颜色可保持几个月不变。Fe3+ 与邻二氮菲作用形成淡蓝色配合物稳定性教差，因此在实际应用中加入还原剂使Fe3+还原为Fe2+ 与显色剂邻二菲作用，在加入显色剂之前，用的还原剂是盐酸羟胺。三、 仪器与试剂：1、 仪器：型分光光度计00ml容量瓶1个，50 ml 容量瓶7个，10 ml 移液管1支5ml移液管支，1 ml 移液管1支，烧杯2 个，吸尔球1个2、试剂：（1）铁标准溶液100ug?ml-1,准确称取0.43107g铁盐NH4Fe(SO4)2?12H2O置于烧杯中，加入0.5ml盐酸羟胺溶液，定量转依入500ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度充分摇匀。（2）铁标准溶液10ug?ml-1.用移液管移取上述铁标准溶液10ml，置于100ml容量瓶中， 并用蒸馏水稀释至刻度，充分摇匀。（3）盐酸羟胺溶液100g?L-1(用时配制)（4）邻二氮菲溶液 1.5g?L-1 先用少量乙醇溶，再加蒸馏水稀释至所需浓度。（5）溶液1.0mol?L-1四、实验内容与操作步骤：1.准备工作(1) 清洗容量瓶，移液官及需用的玻璃器皿。 (2) 配制铁标溶液和其他辅助试剂。 (3) 开机并试至工作状态，操作步骤见附录。 (4) 检查仪器波长的正确性和吸收他的配套性。 .绘制吸收曲线选择测量波长取两支50ml干净容量瓶，移取10μg?ml-1铁标准溶液50ml于其中一个容量瓶中，然后在两个容量瓶中各加入ml 100g?L-1盐酸羟胺溶液，摇匀，放置2min后各加入.00ml邻二氮菲溶液，5ml醋酸钠溶液，用蒸馏水稀释至刻度线摇匀，用cm吸收池，试剂空白为参比，在440——540nm间，每隔10nm测量一次吸光度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，确定最大吸收波长4.工作曲线的绘制取50ml的容量瓶个,各加入10.00μɡ ml-1铁标准0.00,20,4.00,6.00,8.00,10.00ml，然后分别加入ml邻二氮菲溶液，5ml醋酸钠溶液，用蒸馏水稀释至刻度线摇匀，用cm吸收池，以试剂空白为参比溶液，在选定波长下测定并记录各溶液光度5.铁含量的测定取支洁净的50ml容量瓶,加人ml含铁未知试液显色,测量吸光度并记录 440 450 460 470 480 490 500 510 520 530 540 A 0.173 0.18 0.191 0.205 0.212 0.213 0.22 0.227 0.215 0.18 0.14 经测定，铁离子最大吸收波长λ=510nm。 2.工作曲线的绘制： c 0.4 0.8 1.2 1.6 2 A 0.098 0.169 0.254 0.327 0.405 3.样品测定（样品加入量6ml）： 样品编号 吸光度 1 0.255 2 0.259 3 0.259 样品吸光度平均值： 将样品吸光度带入工作曲线得： 样品中铁含量为： Fe（μg?ml-1）= 六、结论 经测定，样品溶液中铁含量为10.3167μg?ml-1。