图位克隆技术在分离植物基因中的应用.pdfVIP

维普资讯 遗 传 HEREDITAS(Beijing)22(3)：180—1852000 壤 述 一 图位克隆技术在分离植物基因中的应用 景润春，黄青 ／朱／英国 ， P — — ．、 — — 一 摘 要 ：本文综述 图位克隆技术的原理及基本技术环节 ，井与其它基因克隆技术相 比较说 明图位克隆技术的优缺 点。本文还对近年来图位克隆技术在分离不 同的植物发育基因上的广泛应用进行了简要概述 ，并对其应用前景和近 期 的预期进展作出展望。 中田分类号： ：．2 文献识码：A、 耪 钼 Q943 文章j夤号：0253—9772(2000)03—0180—06 TheApplicationofMap-basedGeneCloning M ethodon IsolatingGenesofPlants JINGRun-chun，HUANGQjng-yang，ZHUYing-guo fCenterofDevelapmentalBiologyandl~titateofGone．tics，WuhaaUm健 哪 ．Wghan430072，Chiaa Abstract：Inthisreview，theprincipleandbasisstepsofmap-basedgenecloningonplantwere introducedinde- tail．AtthesaIIletime+theadvantagesnaddisadvantageofthemethodwereevaluatde a8comparedwiththeohter methods．Theextensiveapplicationofthemap-basedgenecloningmehtodoncloninggenesofdifferentplantsin htepastwasalsosummarizedinbrief．Theprospectandhteexpectde progressinseveralyearswc3repm~ sedin thispaper． Keywords：nmp-basedgenecloning；genemapping；physicalmap；comprafivemapping cloning或 positionalcloning)…和转座子标鉴 (~ansposontag- l 图位克隆技术的原理及基本技术环节 g4ng)技‘术。转座子标签技术是利用转座子从一十基因座转 现在，分离和克隆发育相美基 因的方法有很多，如传统 到另一十基 因座引起 的插^突变 ，使插^位置的功能基因失 的功能克隆 (ftmctiondelonin8)，即根据纯化的已知基因的产 活并诱导产生突变型，从而可以检测突变基因的位置井分离 物推算其相应的棱昔酸序列，再据此序列合成寡聚棱苷酸探 该基因。利用转座子标签技术对尚未发现转座子的植物进行 针从 eDNA文库或基因组文库 中钓取 目的基因。另外，还有近 基因克隆时，需要将异源的转座子导^该植物 ，但 由于转座 年来发展十分迅速的表型克隆 (phonetypicaleloaln) ．何如 子在不同的植物中转座 的频率和活性相差很大 ，并且需要筛 差别筛选法(d screening)