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实验七血液葡萄糖的测定
* * 实验八 血液葡萄糖的测定 （福林-吴宪氏法） 一、实验目的 1、掌握采用福林-吴宪氏法测定血液中葡萄糖的原理。 2、熟悉分光光度计的使用。 二、实验原理 磷钼酸 钼蓝 （蓝色） C6H12O6 +2Cu(OH)2 C5H11O5COOH +Cu 2O ↓ 3Cu 2O +3H3PO4·2MoO3 ·12H2O 6CuO +3H3PO4·Mo2O3 ·12H2O Na2CO3＋H2O＝NaOH+NaHCO3 NaOH+CuSO4=Cu(OH)2+ Na2 SO4 碱性铜试剂 钼蓝溶液显蓝色，其蓝色的深浅与血滤液中葡萄糖的浓度成正比，选用颜色深浅较接近于测定管的标准管一同比色，即可求出测定管中葡萄糖的含量。 血糖管的使用： 血糖管下部的管径较细，以避免还原生成的氧化亚铜被空气中的氧再氧化，降低实际结果。 三、实验步骤 1、全血无蛋白滤液的制备 抗凝血1ml 蒸馏水7ml 混匀 1/3mol/L硫酸1ml 振摇 10%钨酸纳1ml 振摇 过滤 放置5min 无蛋白血滤液 2、按表操作 混匀，置沸水浴中煮8min。取出用流动自来水冷却3min 无蛋白血滤液 蒸馏水 标准葡萄糖应用液 碱性铜试剂 空白管 标准管 测定管 1.0 2.0 1.0 1.0 - - - 1.0 - 2.0 2.0 2.0 血糖管 试剂ml 磷钼酸试剂 2.0 2.0 2.0 1：4磷钼酸溶液加至 混匀后放置2min 25 25 25 3、比色测定 将各管颠倒混匀后，用空白管调零，在420nm处测定吸收度。 四、操作注意 1、等水沸腾后，才能放入血糖管。加热要准确8分钟。 2、冷却时切不可摇动血糖管，以免还原的氧化亚铜被空气中的氧再氧化，降低实际结果。 3、加入磷钼酸后迅速比色。 4、分光光度计的使用。
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