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实验十一Feulgen及PAS反应
* 实验十一 核酸的显示方法——Feulgen反应 糖类的显示方法——PAS反应 实验目的与要求 掌握Feulgen反应的基本原理 掌握PAS反应的基本原理 熟悉传统细胞化学实验的基本实验技能 一、实验的基本原理 细胞内核酸、蛋白质、 酶、糖与脂类等的显示方法 ?原理：利用一些显色剂与所检测物质中一些 特殊基团特异性结合的特征，通过显 色剂在细胞中的定位及颜色的深浅来 判断某种物质在细胞中的分布和含量。 Feulgen反应的基本原理： 稀HCl水解DNA，破坏嘌呤和脱氧核糖间的配糖键，并在脱氧核糖C1端形成游离的醛基，醛基和Schiff试剂结合，形成紫红色的化合物。因此在有DNA的部位，就会呈现除紫红色阳性反应。 PAS反应的基本原理： 利用强氧化剂使多糖产生游离的醛基，醛基和Schiff试剂结合，形成紫红色的化合物。因此在有多糖的部位，就会呈现除紫红色阳性反应。 二、试剂与器材 青蛙、鸭子 剪刀、载玻片、盖玻片、吸管、甲醇、1 mol/L 盐酸、Schiff试剂、亚硫酸盐溶液、1%亮绿水溶液、1%过碘酸、苏木精、甘油/PBS封片剂 普通光学显微镜 核酸的显示——Feulgen反应 取鸭血，血涂片，室温凉干，甲醇室温固定5 min，凉干; 蒸馏水过一下； 1 mol/L 盐酸(600C )水解8-10 min; 1 mol/L 盐酸（室温）1 min; 蒸馏水稍洗； 置Schiff试剂中室温染色1小时左右； 亚硫酸盐溶液洗3次，总时间为6 min; 自来水流水冲洗5 min，蒸馏水过一下； 用1%亮绿水溶液复染5-10秒； 自来水流水冲洗2 min; 蒸馏水稍洗； 甘油/PBS封片剂封片；显微镜观察。 三、实验步骤 *
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