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微生物学实验论文 —自来水中细菌总数的测定 系别： 生物系 班级： 生物科学1班 姓名： 贾梦琦 学号： 2011131126 自来水中细菌总数的测定各种天然水中常含一定数量的微生物（GB5749-85）37℃培养24h不得超过100个。所谓细菌总数，指1mL水样中所含的细菌菌落的总数。目前一般采用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基在保证无菌的环境下，采取自来水的样品，利用培养基制作平板。按菌落计数方法进行计数，通过实验测得的菌数对照国家饮用水标准来判断水质。本实验应用平板菌落技术测定水中细菌总数，在显微镜下可观察到众多的菌落且种类繁多，取其平均值得到自来水中细菌总数为28个/mL。自来水的微生物学检验，在保证饮水安全和控制传染病上有着重要意义，同时也是评价水质状况的重要指标。 关键字 自来水平板菌落计数技术 Determination of total bacteria in tap water 。 水中微生物的主要来源是：水中的水生性微生物（如光合藻类）、来自土壤径流、降雨的外来菌群和来自下水道的污染物和人畜的排泄物等。水中的病原菌主要来自于人和动物的传染性排泄物。自来水指通过水处理厂净化、消毒后生产出来的符合国家饮用水标准的供人们生活、生产使用的水必须符合国家生活饮用水卫生标准细菌总数是指水样在一定条件下培养后（培养基成分，培养温度和时间、pH、需氧性质等）所得1mL水样所含菌落的总数。本实验只包括一群能在营养琼脂上发育的嗜中温的需氧的细菌菌落总数。3个，细菌总数每毫升不超过100个。所谓细菌总数，指1毫升或1克检样中所含的细菌菌落的总数。本实验按菌落计数方法进行计数，从而判断自来水是否符合国家标准，是否受到污染用平板计数技术测定水中细菌总数1 材料与方法 1.1 材料、试剂与仪器 1.1.1 实验的时间与地点：2013年10月19日———太原师范学院（南区）微生物学实验室 1.1.2 材料：自来水 1.1.3 试剂1.1.4 仪器高压蒸气灭菌锅培养皿玻璃棒电热炉称量杯1.2 实验方法 1.2.1 灭菌 1.2.1.1灭菌物品的放入：首先将高压蒸气灭菌,再向外锅内加入适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。放回内锅层,并加入用报纸包好的培养皿、三角烧瓶、吸管。加盖，并将盖上的排气软管插入内层锅的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺旋，使螺旋松紧一致，勿使漏气。 1.2.1.2 高压蒸气灭菌0.1MPa,121℃,20min灭菌。灭菌时间到后，切断电源，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至“0”时打开排气阀，旋松螺旋，打开盖子，取出灭菌物品。 1.2.2 水样的采取 先放开水龙头使水流5min后，用灭菌后的三角烧瓶接取水样，迅速地进行分析。 1.2.3 制备固体培养基 用营养琼脂粉配制 1.2.4 细菌总数测定 1.2.4.1 加水：灭菌吸管吸取1mL水样，注入其中一套灭菌的培养皿中。共做2个培养皿。 1.2.4.2 加培养基：分别倾注约15mL已溶化并冷却到45℃左右的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，并立即在桌上作平面摇动，使自来水水样与培养基充分混匀。 1.2.4.3 空白对照：另取一空的灭菌培养皿，不加水样，直接倾注牛肉膏蛋白胨琼脂培养基15mL，作空白对照。 1.2.4.4 培养计数：待培养基凝固后，倒置，放于37℃恒温箱中，培养24小时，然后进行菌落计数。两个平板的平均菌落数即为1mL自来水的细菌总数。 1.3 菌落记数方法 （1）每个实验组的菌落数减去对照组的菌落数，所得值相加除以2，就是菌落数的平均数 （2）先计算相同稀释度的平均菌落数，若其中一个平板有较大片状菌苔生长时，则不应采用，而应以片状菌苔生长的平板作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌苔的大小不到平板的一半，而其余的一半菌落分布又很均匀时，则可将此一半的菌落数乘2以代表全平板的菌落数，然后再计算该稀释度的平均菌落数。 首先选择平均菌落数在30～300之间的，则只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，则以该平均菌落数乘其稀释倍数即为该水样的菌落总数若有两个稀释度的平均菌落数均30～300之间，则按两者菌落总数之比值来决定。若其比值小于2，应采取两者的平均数；若大于2，则取其中较小的菌落总数。 若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数。 若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数。若所有稀释度的平均菌落数均不在30～30