提高三角酵母细胞DAO表观活力的透性化研究.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! ! %’(!)(! 年 月 #$$! ! !#$%%’()*$+,( .#(/%0$(,( *+,-+. #$$! - 12 / !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 提高三角酵母细胞!#表观活力的透性化研究 朱彤波 陈 军 张益! 杨蕴刘 焦瑞身 （中国科学院上海植物生理研究所 上海 ） #$$$1# 摘 要 三角酵母（ ）的 氨基酸氧化酶（ ， ， ）是一种胞内 3*#($(#5+*#+6#,# B0 B0+=,+A=C:=C+?8BDE ;F!(5(1(1 1 4 酶，完整细胞并不呈现酶促活性。为了获得三角酵母细胞的较高表观活力，需对细胞进行处理以改变壁和膜对反 应底物和产物的通透性。研究中比较了冻融、丙酮、丁醇和十六烷基三甲基溴化铵（ F8G’G.=8GH’+,=- I.0 / / ， ）等理化因子的透性化效率，并对丙酮的透性化条件进行了优化。证明丙酮的透性化作用与溶剂浓度、 =C8F7DJ 保温时间和温度有关。 丙酮浓度， 保温，可得到最大酶活力。透性化所需时间极短，在 内 1$K16K 5#4L 6=, 即可完成。同时，透性化细胞中的BDE比无细胞抽提液中的酶对热更为稳定。用丙酮透性化细胞作为生物催化 剂可有效地转化头孢菌素 （ ， ）为戊二酰 （ ， ）。 F F8H+’?.=,F FMF 0DFD N’-G+.’00DFD NO0DFD @ @ / 关键词 三角酵母（ ）， 氨基酸氧化酶，透性化，生物转化 3*#($(#5+*#+6#,# B0 1 4 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） P4! D !$$$01$3!#$$!$!0$$10$6 由三角酵母产生的 氨基酸氧化酶（ ， 的酶促转化作用。 B0 BDE FMF ）是一种胞内黄素蛋白酶。作为重要的 ;F!Q5Q1Q1 $ 材料和方法 工业用酶之一， 具有使 氨基酸氧化生成酮 BDE B0 酸并释出R E 和)R 的催化特性，因此，在外消旋 $%$ 材料 # # 1 ［］