《N—磷酰羟基类氨基酸及磷酸酯类的快原子轰击质谱研究》.pdf

维普资讯 J — l(| ／ 化学学报 ACTA CHIM ICA SINICA 1994，52，396--402 Ⅳ一磷酰羟基类氨基酸及磷酸酯类的 快原子轰击质谱研究 尹应武 陈 益 赵 玉芬 … (=)占2；．7 堡 握 忠 Jv一磷酰 的羟基类氨基酸和 0一磷酰氨基酸裂解规律各有特点，N—DIPP-羟基类氨基酸趋向 于先连续丢失两个丙烯，再脱 甲酸，进一步脱水 N-DBP一羟基娄氨基酸则优先丢失甲酸，再分 别失去一分子或两分子丁烯，进而脱水，磷酰基 N—o 的转位特征更明显，质子化磷酸 09)有 相当丰度 0噌 酰丝、苏氨酸则主要发生卢～消除反应，生成DIPP H)或DBP(oHE以及脱 水丝．苏氨酸，t99)质子化磷酸可成基峰 关键词：FAB-MS．Ⅳ一堡錾直基壁：O-磷酰氧基酸，塑 规律，氨基酸分析 舟 瞒 ， 快原子轰击 (FAB)质谱 问世虽然只有十年时间，却已在极性，难挥发和热不稳定化合 物，包括氨基酸，小肽、核苷酸、糖类等生化分子在 内的质谱分析 中得到了较成功的应用． 但在分析氨基酸 小肽及糖类时，往往灵敏度不高，分子离子峰很小，且在低质量区易受底 物峰溶剂峰干扰，使得对来 自样品分子的低质量离子的识别和归属变得困难． 本研究组采用水体系中氨基酸或小肽 的直接 Ⅳ一磷酰化方法先后合成 了近百种各类的 ^L_磷酰氨基酸 、氨基酸酯 、二肽、二肚酯、三肽 、三肽酯及五肚，并对它们 的 FAB-MS 进行了研究，获得了很有意义的结果． 某些中性氨基酸在 EI中根本不出峰，但磷酰化后也能给出 M 或准分子离子峰，在 FAB-MS中其灵敏度则提高数倍甚至数十倍 ·磷酰化产物 的这种显著增敏 效应，使得 FAB—Ms的图谱太为简化 ，底物 (如甘油)峰溶剂及其它离子复合 的干扰峰很少甚至不出 现，所有化台物既给出了相当清晰的分子量信息 (准分子离子峰有相 当高的丰度)，叉表现出 很有规律地裂解特征，提供了较多的结构信息．母离子或有关子离子都伴有失去一分子烯烃 和二分子烯烃的卫星峰，有助于排除杂质峰的干扰．同时磷酸基的存在不但使磷酰肽灵敏度 大为提高，而且使与磷酸基相连的 Ⅳ一端碎片丰度较高，c一端碎片峰被压制，使谱 图简 化，并能方便地进行肽的序列分析．已成功地进行了五肽序列分析． Ⅳ一磷酰氨基酸类．酯类及小肽类的上述特点一为其结构的鉴定．肽的序列分析及反应 性研究、反应机理 的探讨带来了方便 本研究组 曾报道了氨基酸 ^L_磷酰化后的FAB—MS增敏效应 ．总结了部分侧链带官能 l993年 1月4日收到，修改稿于1993年5月11日收到． 本文得到清华大学校 内基金．博士点基金 国家 自然科学基金资助 维普资讯 化学学报 ACTA CHIMICA SINICA 1994 ·397· 基的氨基酸 FAB—MS裂解规律 ，并对 ．v一磷酰的二、三肽及五肽的质诺特征进行了仔细 研究 ，本文将主要报道它们新颖的质诺特性，为讨论方便我们在表 中列举了侧链无官能 基的缬氮酸、环状脯氨酸和倒链具有羧基的谷氨酸，侧链具有羟基的丝、苏氨酸和烃基脯氨 酸等 v_磷 酰化产物 的 FAB质诺 数据，为讨 论 0一磷 酰丝 、苏氨酸 的质谱 特征，探讨 NH2，COOH等侧链官能基存在对其裂解方式的影响，表 中也列举了相关的磷酸三酯类的 FAB—MS数据，并分两种不同的磷酰基 (二异丙氧基磷酸基简称 DIPP和--TI丁氧基磷酰 基简称 DBP)进行讨论 (参见表 l～4)．