墨兰和炭疽菌互作的抗病生理及抗菌肽抑菌作用研究.pdf

摘要 ， f炭疽菌属有19个种，3个种群，是真菌中比较大的。‘个属。炭疽病是兰科 植物常见的一种病害，尤其在墨兰上发生最为严重。炭疽病主要为害墨兰叶片， 发病初期首先在叶尖出现褪绿点，以后褪绿点面积扩大变褐。目前，国内外未有 ∥龙Z 人对墨兰炭疽菌进行过系统性研究。为此，我们附r广东地区墨兰炭疽痫的发病情 ， 况进行了调查，并从墨兰病叶上分离出炭疽菌对其鉴定了种和生物学特性研究。 通过人工接种炭疽菌予墨兰叶片，研究了炭疽菌对墨兰的侵染过程以及炭疽病发 病过程与POD、SOD、PAL、几丁质酶和口一1，3一葡聚糖酶5种酶活性的关系。用 水杨酸和茉莉酸甲酯处理墨兰叶片，研究了2种诱导物对墨兰抗炭疽病和POD 动态变化的作用，并用春雷霉素和武夷菌素2种抗生素类药剂对墨兰炭疽病进行 了防治作用研究。最后，研究了抗菌肽基因产物对炭疽菌的抑制作用，以及根癌 农杆菌介导的双价抗菌肽BD基因转化墨兰。得到如下结果： I．降雨和粗放管理是墨兰炭疽病发病严重的主要原因。3～5月炭疽病发病率上 升最快，后期缓慢，而病情指数到8月达到最大。分析认为广东地区3～4月份 厂 的连日阴雨有利于墨兰炭疽病的流行。溺外，兰棚中墨兰锰苗管理粗放，不及时 清理墨兰病叶残体，放置墨兰的周围地面长期有积水，为炭疽菌分生孢子繁殖提 供了有利的条件。另一方面，目前栽培的墨兰品种不抗炭疽病，}，r+ ， 2． 经真菌学家鉴定，引起广东地区墨兰炭疽病的病原菌是胶孢炭疽菌。该菌对 温度敏感，适温为20℃～30。C，12。C以下和38。C以上菌丝不生长。炭疽菌对pH ， 不敏感。培养基、碳源和光照影响炭疽菌孢子萌发。f炭疽菌对墨兰组织的侵染主 要是通过侵染丝顶端膨大体上产生的次生菌丝完成。受侵染的墨兰组织很快解 、 体，胞浆内的水解物为炭疽菌繁殖提供了营养来源。{一 3． 变化与其各自的催化作用密切相关。PAl，活性于墨兰叶片接种炭疽菌后36h开始 峰值高于第2峰；SOD在接种后12h达到最高，之后下降。几丁质酶和口一1，3 葡聚糖酶在未接种炭疽菌前，活性很低，接种后升高，84h后达到最大。 4． 通过外施sA和MeJh可以诱导墨兰增强对炭疽病的抗病性。表现为墨兰炭疽 IlI 病显症时间推迟，病斑数少，病斑扩展馒，病情指数降低。sA处理的叶片，POD 的2个活性峰高过对照，MeJA处理的叶片仅在第60h的活性峰高于对照，表明 sA和MeJA在诱导墨兰抗炭疽病作用中可能有所不同。春雷霉素和武夷菌素对墨 兰炭痘病有较好的防治效果，其中，春雷霉素的防效好过武夷菌素。 5．经诱导抗菌肽基因在大肠杆菌和毕赤酵母中表达，表达产物对墨兰炭疽菌有 较强的抑制作用。抗菌肽处理后的培养基周围炭疽菌生长慢，菌丝短，稀疏，菌 落扩展慢，产孢少。在抗菌肽基因转化墨兰过程中，适当增加乙酰丁香酮(As) 用量和延长共培养时间可以提高墨兰根状茎的转化率。通过6US基因的瞬时表达 可以看出，共培养时间4d，双价抗菌肽BD基因转化墨兰成功率最高。 关键词：炭疽菌；墨兰；互作；抗性生理；抗菌肽；抑制作用 IV Abstract totheSuttonlS classification According system，theof genus Colletotrichumisconsistedof19 and3 of speciespopulations