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专题九 生物技术实践
第1讲 微生物的利用和生物技术在食品加工中的应用
直击考纲1.微生物的分离和培养。2.某种微生物数量的测定。3.培养基对微生物的选择作用。4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用。5.从生物材料中提取某些特定的成分。6.运用发酵加工食品的基本方法。7.测定食品加工中可能产生的有害物质。
1.判断下列有关传统发酵技术的叙述
(1)在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长(2012·江苏,21A)( √ )
(2)在家庭中用鲜葡萄制作果酒时,让发酵装置接受光照并放在45 ℃处(2010·北京,1AD)( × )
(3)在果酒和果醋制作过程中,果酒的制作过程是在缺氧条件下,而果醋整个制作过程一直处于有氧条件下(2010·江苏,7AC改编)( × )
(4)与果醋、果酒制作相比,腐乳的制作所需要的适宜温度最高,所用菌种为乳酸菌(2011·江苏,3AC)( × )
(5)在腐乳制作过程中必须有能产生蛋白酶的微生物参与,所用豆腐的含水量为70%左右,水分过多腐乳不易成形(2008·江苏,17AB改编)( √ )
2.判断下列有关微生物的培养与应用的叙述
(1)常用液体培养基分离获得细菌单菌落(2012·大纲全国,5B)( × )
(2)用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基,经高温、高压灭菌后倒平板(2009·安徽,6A)( √ )
(3)纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法(2011·新课标全国,39)( √ )
(4)测定培养液中微生物数量,可选用显微镜直接计数法计数(2010·山东,34)( √ )
3.判断下列关于植物有效成分提取的叙述(2011·海南,30和2008·宁夏,37组合)
(1)薄荷油是挥发性物质,提取薄荷油时应选用干薄荷叶作原料,可采用水蒸气蒸馏法提取( × )
(2)用萃取法提取薄荷油时,采用的溶剂是酒精,原理是薄荷油易溶于有机溶剂酒精中( √ )
(3)萃取法提取胡萝卜素的主要步骤是:干燥、粉碎、萃取、浓缩、过滤( × )
(4)在胡萝卜颗粒的加热干燥过程中,温度过高和时间过长会导致胡萝卜素分解( √ )
(5)提取的胡萝卜素可通过纸层析法进行鉴定,在鉴定过程中不需要对照 ( × )
重点一 微生物的利用
1.微生物的培养
(1)无菌技术:主要包括消毒和灭菌。
①消毒方法:常用煮沸消毒法、巴氏消毒法。
②常用灭菌方法:灼烧灭菌——接种环、接种针等金属器具;干热灭菌——主要针对玻璃器皿等;高压蒸汽灭菌——主要针对培养基等。
(2)如图为倒平板操作过程,操作时要待培养基冷却至50_℃左右时,在酒精灯火焰附近进行。
制备固体培养基最后要将平板倒置,其主要目的是防止培养皿盖上的水珠滴入培养基造成污染。
(3)平板划线操作
(4)稀释涂布平板法:先将菌液进行一系列梯度稀释后涂布平板,在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞,从而在培养基表面形成单个菌落。如图所示:
技能点拨 (1)平板划线操作的注意事项
①每次划线之前都需要灼烧接种环灭菌。
②灼烧接种环之后,要冷却后才能伸入菌液,以免温度太高杀死菌种。
③划线时最后一区域不要与第一区域相连。
④划线用力大小要适当,防止用力过大将培养基划破。
(2)平板划线法中的“连续划线”及稀释涂布平板法中的“系列稀释”目的是一样的,都是为了保证菌种在培养基中单个分布(平板划线法中最后一次划线的末端处的菌种最纯)。
2.某种微生物的分离与计数
(1)分离——选择培养基。
①培养基中加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。②培养基中加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。
③培养基中缺乏氮源时,可以分离固氮微生物。
④当培养基的某种营养成分为特定化学成分时,也具有分离效果。
⑤改变微生物的培养条件,也可以达到分离微生物的目的,如将培养基放在高温环境中培养只能得到耐高温的微生物。
(2)计数
①土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
a.筛选菌株:利用以尿素为唯一氮源的选择培养基筛选菌株。
b.计数方法:活菌计数法和显微镜直接计数法。前者为了增强实验的说服力和准确性,则需设置重复组,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。
c.过程:土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察。
②分解纤维素的微生物的分离
a.实验原理
即:可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
b.流程:土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌落。
(3)鉴定方法
鉴定分解尿素的细菌 含酚红指示剂的尿素为唯一氮源的培养基→细菌→指示剂变红,则该菌能分解尿素 鉴定纤维素分解菌 技能点拨 (1)分离微生物所用的选择培养基一定是固体培养基,因为菌落只能在固体培养基上生成。
(2)平板划线法只适用于微生物的提纯,不适合进行计数,并且在最后一次
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