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安徽医科大学学报990225 安徽医科大学学报 ACTA UNIVERSITATIS MEDICINALIS ANHUI 1999年 第34卷 第2期Vol.34 No.2 1999 一种适合基层单位使用的超氧阴离子检测法 姚余有　周爱武　李常玉 主题词　自由基/分析； 超氧化物类/分析 中国图书资料分类法分类号　R340.5 　　超氧阴离子 是氧自由基的主要成份，现代医学证实其与心脏病、糖尿病、自身免疫性疾 病有关 〔1〕 。故药物的抗 能力将预示其可能有改善上述疾病病情的作用。目前，测量 的方 〔2〕 法主要有化学发光法和电子自旋捕获法 ，以上两法需要化学发光仪或电子自旋捕获仪，不 适合基层单位使用。为此我们进行了本研究。 1　材料与方法 1.1　材料　黄嘌呤(X，AR级），还原性辅酶Ⅰ（NADH，AR级）：上海东风生化试剂公司产 级）：Fluka公司产品；氯化硝基四唑氮蓝（NBT，AR级）：华美公司进口分装；Vit E（AR 级）：Merck公司产品。 1.2　仪器　721分光光度计：上海第三分析仪器厂产品。 1.3　实验方法 的检测 〔3〕 1.3.1　X-XO体系产生 　温度和反应时间对X-XO体系产生 .-1 的影响。反应总体积2 ml，内含X 100 μmolL 、 .-1 .-1 L 、0.1 molL PBS(pH 7.4），分别于25℃、37℃、40℃预温5 min后，加入XO NBT 300 μmol .-1 （14 UL )起动反应，于560 nm处动态测量不同温度、不同时间吸光度（A)值。A值反映NBT还 原量，间接反映 产生量。 　NBT浓度对X-XO体系产生 .-1 检测的影响。反应总体积2 ml，内含X 100 μmolL ，不同 .-1 .-1 L PBS（pH 7.4），37℃预温5 min后加入XO（终浓度14 UL )动态检测A 浓度的NBT和0.1 mol 值。 .-1 检测的影响。反应总体积2 ml，内含X 100 μmolL ，NBT 　XO浓度对X-XO体系产生 .-1 .-1 L 和0.1 molL PBS (pH 7.4），37℃预温5 min后加入不同浓度XO，反应30 min后立即 300 μmol 测定A值。 的检测 1.3.2　非酶体系产生 　温度和反应时间对非酶体系产生 .- 的影响。反应总体积2 ml，内含NADH 78 μmolL 1 .-1 .-1 、NBT 50 μmolL 、0.1 molL PBS(pH 7.4)，分别于25℃、37℃、40℃预温5 min后，以PMS .-1 L ）起动反应，560 nm处动态观察A值。 （10 μmol .-1