右归胶囊对肾阳虚证大鼠激素水平变化的影响.docVIP

右归对肾阳虚证大鼠激素水平变化的影 [摘 要] 目的 本研究通过对多种内分泌激素含量的测定，观察右归对肾阳虚证大鼠下丘脑-垂体 靶腺（甲状腺、肾上腺、性腺）轴功能变化的影响。 方法 选用SD雄性大鼠，随机分为：正常对照组（n=10），肾阳虚模型组（n=12），右归组（n=11）。通过氢化可的松复制肾阳虚证动物模型，并用右归进行防治。采用放射免疫分析技术观察各组动物血清促甲状腺素（TSH）、甲状腺素（T4）、三碘甲状腺原氨酸（T3）、3，3’，5’-反三碘甲状腺原氨酸（rT3）；睾酮（T）、雌二醇（T2），下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）及血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质醇（Cor）水平的变化。 结果 肾阳虚模型组与正常对照组相比T4、T3含量显著降低（p0.01），TSH、rT3则升高（p0.01）；T下降（p0.01），T2上升（p0.01）；T2/T比值升高（p0.01）及CRH、ACTH、Cor含量均显著下降（p0.01）。而经灌服右归后，与肾阳虚证模型组相比上述激素水平均明显改善（p0.05～0.01）。 结论 右归具有下丘脑-垂体-甲状腺、肾上腺、性腺轴多层次的调节作用。 关键词：肾阳虚证 右归 激素 中图分类号：R241 文献标识码：B 文章编号：1672-5085（2008）4-0044-03 　　右归出自《景岳全书》，是治疗肾阳虚证的代表方，具有温补肾阳，填精补血之功。临床上用于肾阳不足、命门火衰所致肾阳虚证有明显的疗效。为进一步探讨该方的作用机理，本实验采用氢化可的松复制肾阳虚动物模型，观察该方对肾阳虚大鼠血清促甲状腺素（TSH）、甲状腺素（T4）、三碘甲状腺原氨酸（T3）、3，3’，5’-反三碘甲状腺原氨酸（rT3）、睾酮（T）、雌二醇（T2），下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）及血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质醇（Cor）水平变化的影响。 　　1 材料和方法 　　1.1 动物 　　实验采用清洁级雄性SD大鼠，体重200±20g，由广东省医学实验动物中心提供，许可证号为：粤监证字2006A015。 　　1.2 药物 右归，有限公司生产，批号6013022。氢化可的松注射液，扬州制药有限公司生产，批号 　　1.3 试剂与仪器 　　TSH、T4、T3、rT3、T、T2试剂盒，均由北京科美东雅生物技术有限公司提供；CRH试剂盒，由第二军医大学神经学教研室提供；ACTH、Cor由北京北方生物技术研究所提供。 　　测量仪器为：智能放免γ测量仪：上海原子核研究所日环仪器一厂（SN-695B型） 　　1.4 肾阳虚大鼠模型的复制[1] 　　大鼠经适应喂养3天后，将33只大鼠随机分为3组：正常对照组(n=10)，大鼠肌肉后肢注射生理盐水1ml/只·d，两后肢交替注射，同时灌服蒸馏水2ml/只，连续14d；肾阳虚模型组(n=12)，大鼠肌肉后肢注射氢化可的松25mg/（kg·d），两后肢交替注射，同时灌服蒸馏水2ml/只，连续14d；右归组(n=11)，大鼠肌肉注射氢化可的松25mg/（kg·d），两后肢交替注射，同时每天灌服右归，给药剂量为5.8g/kg，连续14d。 　　各组大鼠末次给药后16小时从眼球取血，离心，取上清，-40保存血清/血浆待测。然后处死大鼠，取下丘脑，按照试剂盒说明进行匀浆，离心，取其上清液，－40保存待测。采用放射免疫分析法，观察各组动物血清TSH、T4、T3、rT3、T、T2；血浆ACTH、Cor；下丘脑CRH水平的变化。严格按试剂盒说明书要求并由专人进行操作，所有样品一次完成实验。 　　1.5 统计学分析 　　数据以均数±标准差 表示，计量资料的显著性检验用SPSS 13.0医学统计软件进行数据处理。 　　2 结果 　　2.1 一般状态观察 　　正常对照组动物表现为：毛发滑顺，体重逐日增加，双目有神，反应、活动灵敏，正常进食饮水。肾阳虚模型组大鼠于实验第5日开始出现竖毛、身体蜷缩、扎堆，眼睛半眯、小便次数变多等现象，第11—14天肾阳虚症状更加明显：体重减轻、毛松无光泽、弓背、怕冷、喜蜷缩扎堆、精神萎靡、倦怠少动和反应迟钝，少食和饮水量减少，小便次数及小便量增多。而右归组较肾阳虚模型组动物的各种症状有明显改善。 2.2 右归对肾阳虚证大鼠血清T4、T3、rT3、TSH水平的影响 结果显示（见表1），肾阳虚模型组大鼠血清T4、T3含量比正常对照组显著下降（p0.01），TSH和rT3升高明显（p0.01）。经灌服右归后，T4、T3含量升高，与肾阳虚模型组比较有显著差异（P0.01）。而TSH和rT3（p0.05）含量则下降。 　　2.3 右归对肾阳虚证大鼠下丘脑CRH、血浆ACTH和Cor水平的影响