生物化学实验讲义 2011.docVIP

生物化学实验 生物化学实验基本要求 ?一、生物化学实验室规则 ?1. 每个同学都应该自觉遵守课堂纪律，维护课堂秩序，不迟到，不早退，不大声谈笑。 ?2. 实验前必须认真预习，熟悉本次实验的目的、原理、操作步骤，懂得每一操作步骤的意义和了解所用仪器的使用方法，否则不能开始实验。实验过程中要严肃认真地按操作规程进行实验，并把实验结果和数据及时、如实记录在实验记录本上，文字简练、准确，要求同学们记录完整准确的实验数据，养成良好的实事求是的工作作风和求真务实的科学态度，严禁伪造实验数据，弄虚作假。 ?3. 实验台面应随时保持整洁，仪器、药品摆放整齐，公用试剂用毕，应立即盖严放回原处。勿使试剂、药品洒在实验台面和地上。实验完毕，仪器须洗净放好，将实验台面抹试干净，才能离开实验室。 ?4. 使用仪器、药品、试剂和各种物品必须注意节约。洗涤和使用仪器时，应小心细致，防止损坏仪器。使用贵重精密仪器时，应严格遵守操作规程，发现故障须立即报告教员，不得擅自动手检修。 ?5. 实验室内严禁吸烟！煤气灯应随用随关，严格做到：人在火在，人走火灭。乙醇、丙酮、乙醚等易燃品不能直接加热，并要远离火源操作和放置。实验完毕，应立即关好煤气开关和水笼头，拉下电闸。离开实验室以前应认真、负责地进行检查，严防发生安全事故。 ?6. 所有实验用的废液，废弃物等，都要收集在适当的容器内，加以储存再处理，不能倒在水槽内或到处乱扔。 ?7. 仪器损坏时，应如实向教员报告，并填写损坏仪器登记表，然后补领。 ?8. 实验室内一切物品，未经本室负责教员批准，严禁携出室外，借物必须办理登记手续。 ?9. 每次实验课由班长负责安排值日生。值日生的职责是负责当天实验室的卫生、安全和一切服务性的工作及填写《实验情况登记卡》和《实验记录》。 二、实验报告要求及格式 ?实验结束后，应及时整理和总结实验结果，写出实验报告。 ?下面简单介绍实验报告的格式。 ?（实验名称） 姓名 学号 日期 ?目的和要求 ?原理 ?试剂配制及仪器 ?操作方法 ?实验结果 ?讨论与分析 ? 在实验报告中，目的和要求、原理以及操作方法部分应简单扼要的叙述，但是对于实验条件（试剂配制及仪器）和操作的关键环节必须写清楚。对于实验结果部分，应根据实验课的要求将一定实验条件下获得的实验结果和数据进行整理、归纳、分析和对比，并尽量总结成各种图表，如原始实验数据及其处理的表格、标准曲线图以及比较实验组与对照组实验结果的图表等。另外，还应针对实验结果进行必要的说明和分析。讨论部分可以包括：关于实验方法（或操作技术）和有关实验的一些问题，如实验的正常结果和异常现象以及思考题，进行探讨；对于实验设计的认识、体会和建议；对实验课的改进意见等。 三、生物学实验室常用仪器使用方法与保养 1、冷冻离心机  低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中，都离不开低温离心技术，因此低温冷冻离心机已成为分子生物学研究中必需的重要工具。  使用方法： (1）离心机应放置在水平坚固的地板或平台上，并力求使机器处于水平位置以免离心时造成机器震动。 (2).打开电源开关，按要求装上所需的转头，将预先以托盘天平平衡好的样品放置于转头样品架上（离心筒须与样品同时平衡），关闭机盖。 (3).按功能选择键，设置各项要求：温度、速度、时间、加速度及减速度，带电脑控制的机器还需按储存键，以便记忆输入的各项信息。 (4).按启动键，离心机将执行上述参数进行运作，到预定时间自动关机。 (5).待离心机完全停止转动后打开机盖，取出离心样品，用柔软干净的布擦净转头和机腔内壁，待离心机腔内温度与室温平衡后方可盖上机盖。  注意事项： (1).机体应始终处于水平位置，外接电源系统的电压要匹配，并要求有良好的接地线。 (2).开机前应检查转头安装是否牢固，机腔有无异物掉入。 (3).样品应预先平衡，使用离心筒离心时离心筒与样品应同时平衡。 (4).挥发性或腐蚀性液体离心时，应使用带盖的离心管，并确保液体不外漏，以免腐蚀机腔或造成事故。 (5).擦拭离心机腔时动作要轻，以免损坏机腔内温度感应器。 (6).每次操作完毕应作好使用情况记录，并定期对机器各项性能进行检修。 (7).离心过程中若发现异常现象，应立即关闭电源，报请有关技术人员检修。 附：相对离心力与每分钟转速的换算 离心机的转速，在以前实验资料中一般以每分钟多少转来表示。由于离心力不仅为转速函数，亦为离心半径的函数，即转速相同时，离心半径越长，产生的离心力越大。因此仅以转速表达离心力是不够科学的，近年来主张用相对离心力（RCF）来表示比较合理。现在国际资料中，已改用相对离心力来表示