《PMP柱前衍生高效液相色谱法分析杜氏盐藻多糖的单糖组成》.pdf

维普资讯 第 26卷 第2期 分析测试学报 V01．26No．2 2007年 3月 FENXICESHIXUEBAO(JournalofInstrumentalAnalysis) 206—210 PMP柱前衍生高效液相色谱法分析 杜氏盐藻多糖的单糖组成 戴 军 ，朱 松 ，汤 坚 ，王 曼 ，尹鸿萍 ，陈尚卫 (1．江南大学 分析测试中心，江苏 无锡 214036；2．江南大学 食品科学与安全教育部重点实验室 ， 江苏 无锡 214036；3．中国药科大学 生命科学学院，江苏 南京 210009) 摘 要 ：建立了柱前 PMP衍生高效液相色谱法分离检测8种中性糖、2种糖醛酸及2种糖胺的方法。筛选出 适合PMP衍生物分离的色谱柱为EclipseXDB—C。，以0．1m L磷酸盐缓冲液一乙腈为流动相 ，考察了pH值 和乙腈体积分数对各种糖的PMP衍生物的保留及分离的影响，确定最佳 pH值为6．7，最佳乙腈体积分数为 17％；比较了不同衍生反应时间和萃取除杂前不同量盐酸中和反应产物时醛糖 一PMP衍生物的峰面积大小变 化，从而得到较佳的样品衍生化条件。应用优化的色谱条件和样品制备方法，测定了由杜氏盐藻提取纯化的 多糖级分PIMa和PIMb的单糖组成，其测定结果与高效阴离子交换色谱法的结果基本一致。 关键词 ：杜氏盐藻；多糖 ；单糖；高效液相色谱；柱前衍生化 ；1-苯基_3一甲基_5一吡唑啉酮 中图分类号：0657．72；0629．112 文献标识码：A 文章编号 ：1004—4957(2007)02—0206—05 AnalysisofMonosaccharideCompositionsinPolysaccharidesfron D．Salina byPre—columnDerivatizationHi PerformanceLiquidChromatography DAIJun ，_．ZHUSong，TANGJian，，WANGMin ，YINHong—ping，CHENShang—wel‘ (1．TestingAnalysisCenterofSouthernYangtzeUniversity，Wuxi 214036，China；2．Keylaboratoryof FoodScienceandSafety，Ministry ofEducation，Southern YangtzeUniversity，Wuxi 214036，China； 3．CollegeofLifeScience，ChinaPharmaceuticalUniversity，Nnajing 210009，China) Abstract：A simpleand sensitivehighperformanceliquidchromatographicmethodforsimultaneous detemr inationofeightkindsofneutralmonosaeeharides，twokindsofuronicacidandtwokindsofgly— cosaminebypre．columnderivatizationwith1-phenyl-3一methyl一5一pyrazolone(PMP)hasbeendevel— oped．TheeffectsofvolumeratiosofacetonitriletophosphatebufferandpH ofmobilephaseonreten— fion andseparation0fPMP derivativesofthetenmonosaeeharideswereinvestigatedwiht EclipseXPB— C1Column(4．6mmX250mm)．Theresultsshowedthathteoptimum volumeratioofacetonitrileto bufferwas17 ：8