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生物通 2008 技术点评： 流式细胞分选 流式细胞仪（Flow Cytometer ）是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和 分选的检测手段，可以每秒钟分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数。其应用范围 非常广泛，而且还在不断增加。当然，细胞分选也是它的重要应用之一。它能够根据每个细胞的光 散射和荧光特征，将特定的细胞从细胞群体中分选出来。每次一个细胞。所以人们又常常将流式细 胞仪称为荧光激活细胞分选仪（fluorescence-activated cell sorter, FACS ），其实FACS 并不是流 式细胞仪的通称，它是BD 公司的注册商标。 细胞分选的原理 负选同时进行。以前的流式细胞仪只能给液滴 充上正电荷或负电荷，因此在电场中只能向左 当经荧光染色或标记的单细胞悬液放入 或向右偏转，即两路分选。现在的仪器可以给 样品管中，被高压压入流动室内。流动室内充 液滴充以不同的电量，从而调整液滴的偏转角 满鞘液，在鞘液的包裹和推动下，细胞被排成 度，实现多路分选。BD 的 FACSAria 流式细 单列，以一定速度从流动室喷口喷出。在流动 胞仪就可以进行四路分选。 室的喷口上配有一个超高频的压电晶体，充电 后振动，使喷出的液流断裂为均匀的液滴，待 3. 不仅仅限于表面抗原，流式细胞仪可 测细胞就分散在这些液滴之中。将这些液滴充 以根据任何能检测到的发光度（如细胞体积） 以正、负不同的电荷，当液滴流经过带有几千 或荧光（如 DNA、RNA 或蛋白含量，酶活性， 伏的偏转板时，在高压电场的作用下偏转，落 特异抗原）散射度差异来分离细胞。如果能保 入各自的收集容器中，没有充电的液滴落入中 证流式细胞仪的无菌状态，那么分选后的细胞 间的废液容器，从而实现细胞的分离。 还可以进行培养或其他分析。 流式细胞分选的特点 4. 如果只是偶尔做几次细胞分选的话， 用流式分选还是比较划算的，只需要准备样品 1. 少量细胞分选时，流式细胞分选精确 和抗体，交纳一定的仪器使用费即可，不需要 度高（99% 以上），速度快。目前，先进的 购买配套的设备。 流式细胞仪的分选速度可达 25 000 个细胞/ 秒以上，比传统的分选速度提高了很多倍，原 流式细胞仪 来需要一天的工作现在只需要几小时就能完 由于价格的原因，大家对流式细胞仪一直 成。不过流式细胞仪分离细胞的量还是有一定 是心有余而力不足，但现在它也开始进入一些 的限制，一次分离的最大合理量约为 108 个 大型实验室了。市场上销售的流式细胞仪产品 细胞。如果细胞量超过 109 个，则需要耗费 种类很多，主要生产厂家有：BD、Beckman 10 小时以上，分选后细胞的活力会受到很大 Coulter、Partec