实验三 发酵罐使用及灭菌.pptVIP

实验报告： 1、灭菌时为什么要搅拌？ 2、降温时为什么要通气？ * * 实验三 培养基的制备、实罐灭菌 及接种培养技术 一、实验目的： 学会反应器实罐灭菌，掌握无菌接种技术，掌握培养方法。二、实验原理： 发酵罐能够提供微生物生长的适宜环境。三、实验器材 发酵罐，带灭菌培养基等。 L1523发酵罐操作流程 1、发酵前准备工作 1) 把进气过滤器、补料瓶、及可能用到的各种插针在高压锅内灭菌。 2) 打开水、电、空压机 3) 打开发酵罐总电源 4) 校正PH电极。之后插入发酵罐内 5) 将提前配好的培养基放入罐内，并加入消泡剂。 四、操作步骤 2、发酵过程 1) 灭菌 ① 插入所需电极，调整消泡电极高度，关闭罐盖上所用接口(确认无任何软管连接)。 ② 启动搅拌，设定转速在300-500 r/min。 ③ 设定温度setp1的值为“0”，使夹套进水。保持约2分钟后，再改回培养温度。 ④ 打开排气。 ⑤ 设定灭菌菜单，确认后启动灭菌模式，开始灭菌。 [具体方法见后] A．到95℃时，系统出现提示，此时关小排气(关闭 后，回 旋1/3圈)，按“OK”。 B．当温度达到121℃时，较正PO2零点。 C．降温到100℃时，系统出现提示。此时，在火焰保护下接好进气插针，并通入压缩气体。 D．到达培养温度后，设定好转速、通气量后。此时校正PO2的100%。 2）接种 3）补料 4）取样 补料时在火焰保护下插针，需加酸时禁止采用HCl (对不锈钢有腐蚀性) 通过蒸汽灭菌罐底取样口取样 5) 放料 放料前，务必先要关闭温度和转速，确认面板显示“OFF” 接种可采用两种方法： 一是采用火焰保护，二是用蠕动泵流加。 3、清洗 4、关机 在关闭电源前，确认温度和转速处于“OFF”状态。电源关闭后，及时关闭冷却水。发酵罐在不使用的情况下，一般保持一定体积的清水。 在不开罐的情况下，放入水，加大转速即可。废水可以从底阀排出。 *