实验八 水中生物化学需氧量的测定.docVIP

水中生物需氧量BOD5的测定 （碘量法） 一、原理 生化需氧量是指在一定条件下，微生物分解水中有机物质所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。分别测定水样培养前的溶解氧含量和在（20±1）培养5天后的溶解氧含量，两者之差即为五日生化过程所消耗的氧量（BOD5），以mgO2/L表示。 ????对于某些地面水及大多数工业废水、生活污水，因含较多的有机物，需要稀释后再培养测定，以降低其浓度，保证降解过程在有足够溶解氧的条件下进行。具体水样稀释倍数可借助于高锰酸钾指数或化学需氧量（COD）推算。 ????对于不含或少含微生物的工业废水，在测定BOD5时应进行接种，以引入能分解废水中有机物的微生物。当废水中存在难于被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应接种经过驯化的微生物。 ????如生化需氧量7mgO2/L时，可直接测定水样在20°C培养5天前后的溶解氧减少量，即为BOD520（BOD5）。 ??如生化需氧量7mgO2/L时，由于水中有机物含量多、溶解氧有限，则在培养之前必须用含有一定养份和饱和溶解氧的水（稀释水）稀释，使培养后减少的DO至少是2mg/L，水中剩余的DO最好在1mg/L以上，这样的稀释量才能得到可靠的结果。 三、方法的适用范围 ????本方法适用于测定BOD5大于或等于2mg/L，最大不超过6000mg/L的水样。当水样BOD5大于6000mg/L时，会因稀释带来一定的误差。 四、仪器 （1）恒温培养箱（20±l℃）； （2）5~20L下口玻璃瓶； （3）1000mL量筒； （4）玻璃搅棒：棒的长度应比所用量筒高度长200mm。在棒的底端固定一个直径比量筒底小、并带有几个小孔的硬橡胶板。 （5）溶解氧瓶：250~300mL之间，带有磨口玻璃塞并具有供水封用的钟形口。 （6）虹吸管：供分取水样和添加稀释水用。 五、试剂 （1）磷酸盐缓冲溶液：将8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4），21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4），33.4g七水合磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O）和1.7g氯化铵（NH4Cl）溶于蒸馏水中，稀释至1000mL，此溶液的pH应为7.2。 （2）硫酸镁溶液：将22.5g七水合硫酸镁（MgSO4·7H2O）溶于蒸馏水中，稀释至1000mL。 （3）氯化钙溶液：将27.5g无水氯化钙溶于蒸馏水，稀释至1000mL。 （4）氯化铁溶液：将0.25g六水合氯化铁（FeCl3·6H2O）溶于蒸馏水，稀释至1000mL。 （5）盐酸溶液（0.5mol/L）：将40mL（ρ=l.18g/mL）盐酸溶于蒸馏水，稀释至1000mL。 （6）氢氧化钠溶液（0.5mol/L）：将20g氢氧化钠溶于蒸馏水，稀释至1000mL。 （7）亚硫酸钠溶液（1/2Na2SO3=0.025mol/L）：将1.575g亚硫酸钠溶于蒸馏水，稀释至1000mL。此溶液不稳定，现用现配。 （8）葡萄糖-谷氨酸标准溶液：将葡萄糖（C6H12O6）和谷氨酸（HOOC-CH2-CH2-CHNH2一COOH）在103干燥1h后，各称取150mg溶于水蒸馏中，移入1000mL容量瓶内并稀释至标线，混合均匀，用前配制。 （9）稀释水：在5~20L玻璃瓶内装入一定量的蒸馏水，控制水温在20℃左右。然后用无油空气压缩机、薄膜泵或抽水曝气装置（见图4—28），将吸入的空气先后经活性炭吸附管及水洗涤管后，导入瓶内曝气2~8h，使瓶中水的溶解氧接近于饱和。曝气亦可导入适量纯氧。瓶口盖以两层经洗涤晾干的纱布，置于20培养箱中放置数小时，使水中溶解氧含量达8mg/L左右。临用前每升水中加入氯化钙溶液、氯化铁溶液、硫酸镁溶液、磷酸盐缓冲溶液各1mL，混合均匀。稀释水的pH值应为7.2，其BOD5应小于0.2mg/L 图 4—28 稀释水曝气装置（10）接种液：可选择以下任一方法，以获得适用的接种液。 城市污水：一般采用生活污水，在室温下放置一昼夜，取上清液供用。 表层土壤浸出液：取100g花园或植物生长土壤，加入1L水，混合并静置10min。取上清液供用。 含城市污水的河水或湖水。 污水处理厂的出水。 当分析含有难于降解物质的废水时，在其排污口下游适当距离处取水样作为废水的驯化接种液。如无此种水源，可取中和或经适当稀释后的废水进行连续曝气，每天加入少量该种废水，同时加入适量表层土壤或生活污水，使能适应该种废水的微生物大量繁殖。当水中出现大量絮状物或化学需氧量去除率有较大提高时，表明适用的微生物已进行繁殖，可用作接种液。一般驯化过程需要3~8d。 （11）接种稀释水：分取适量接种液，加于稀释水中，混匀。每升稀释水中接种液加入量为生活污水1~10mL；或表层