小鼠经口的急性毒性评价.docVIP

小鼠经口的急性毒性评价 食品质量与安全：张志颖 指导教师：丁志刚 摘要：通过霍恩法对啮齿类动物小白鼠做急性毒性实验，以氯化镁溶液为外源化学物，了解氯化镁溶液对机体是否产生毒效应。确定外源化学物的致死剂量及其他急性毒性参数，通过观察动物中毒表现、毒作用强度和死亡情况，初步评定外源化学物的毒效应特征、靶器官、剂量—反应关系和对人体产生损害的危险性。 关键词：小白鼠 氯化镁溶液 霍恩法 急性毒性评价 1前言 氯化镁常温下为白色结晶，易吸湿，100℃时失去2分子结晶水，在110℃开始失去部分盐酸而分解，强热转为氧氯化物，其PH约为7,有刺激性，氯化镁是有毒的，其次氯化镁是低毒的。 氯化镁本身的毒性来自其本身凝血的作用，例如卤水点豆腐，就是使蛋白质凝固。假如一定剂量的氯化镁进入血液，血液凝固，人必死无疑。所以说氯化镁对于温血动物来说还是有一定的 杀伤力。制作豆腐时，氯化镁可以作为很好的混凝剂。它常与硫酸镁一起凝固豆奶，由于其营养价值，氯化镁还是婴儿配方奶粉的组成部分。 2材料与方法 2.1 材料 试验动物：健康成年小鼠16只，雌雄各半，体重在18~25g之间。 2.2仪器与试剂 试验器材：注射器、刻度吸管、容量瓶、小烧杯、滴管、灌胃针、电子天平、镊子、动物体重秤、手套。 试验试剂：受试物（氯化镁）、3%~5%的苦味酸溶液、0.5%的品红溶液。 2.3实验方法 2.3.1健康动物选择 2.3.2性别辨认 2.3.3小鼠称重、编号和随机分组 根据霍恩法将小鼠分为4个小组，每组4只。 编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 随机数 18 43 38 62 82 16 48 35 67 05 72 12 25 83 43 41 除4余数 2 3 2 2 2 0 0 3 3 1 0 0 1 3 1 1 所在组别 二 三 二 二 二 四 四 三 三 一 四 四 一 三 一 一 2.3.4剂量设置（1000mg/kg、2150mg/kg、4640mg/kg、10000mg/kg） 组号 一 二 三 四 染毒剂量 1000mg/kg 2150mg/kg 4640mg/kg 10000mg/kg 每组小鼠染毒毫克数 27.75mg 57.587mg 122.96mg 280mg 2.3.5氯化镁溶液的配制 （1）氯化镁的量取（称量法） 准确称取12.6575g的氯化镁固体，加蒸馏水溶解后，倒入25ml容量瓶，混匀，再加蒸馏水定容至刻度。备用浓度为506.3mg/ml。 （2）氯化镁溶液的稀释 等容量稀释法：根据试验确定的四个剂量组剂量（1000mg/kg、2150mg/kg、4640mg/kg、10000mg/kg）将氯化镁稀释分别配制成不同浓度溶液，各个剂量组的动物按20ml/kgBW的容量灌胃，则应配制成四个不同浓度，依次为：50.65mg/ml(11.6ml)、109.1mg/ml(11.6ml)、235mg/ml（11.6ml）、506.3mg/ml。 2.3.6灌胃 对四个剂量组的小鼠采用经口灌胃法一次性给予氯化镁溶液，各剂量组的灌胃体积相同，小鼠常用容量为20ml/kgBW。若一次给予量太大，也可在24h内分2~3次给予，每次间隔4~6h，但合并作为一次剂量计算。 试验动物在试验前一般禁食16h左右，不限制饮水。染毒后继续禁食3~4h。若采用分多次染毒，根据染毒时间长短，必要时可给动物一定量的的食物。 2.4检测指标 急性毒性实验除了要获得主要参数LD50外，还要全面观察动物的各种反应和变化，仔细分析实验动物在染毒后出现的中毒表现、剂量—效应、时间分布等，这对于了解外源化学物的毒性作用特征，获取尽可能多的毒性信息非常重要，可以补充LD50表示急性毒性的不足。 2.4.1小鼠中毒症状和死亡情况观察 染毒后要注意观察小鼠中毒表现和死亡情况。观察指标通常包括小鼠外观、行为、分泌物、排泄物、死亡情况（死亡时间、濒死亡前的反应）、体重变化（给药前、试验结束处死动物前各称重一次，观察期间可每3天称重一次）等，观察时间为7天，对死亡小鼠和观察期满存活小鼠处死进行大体解剖，认真做好试验记录。试验结束后，要按照试验结果，填写急性毒性试验记录表。 组别 动物编号 体重 染毒总剂量mg/kg 灌胃容量ml 中毒症状 中毒时间 死亡时间 体重变化记录 第一组 10 27g 1000 0.4ml 染毒后活动减少，精神萎靡，抱团睡觉，一天之后回归正常。之后几天小鼠存活，无异常。 染毒后 0g 13 27g 0.4ml -1g 15 28g 0.4ml 0g 16 29g 0.4ml 0g 第二组 1 28g 2150 0.4m