《MhRAR1和MhSGT1基因转化苹果提高轮纹病菌诱导的抗氧化酶活性》.pdf

园 艺 学 报 2013，40 (12)：2354—2364 http：／／Ⅵ，、V ahs．ac．ca ActaHorticulturaesinica E—mail：yuanyixuebao@126．com 和 G盯 基因转化苹果提高轮纹病 菌诱导的抗氧化酶活性 屠煦童，张仕杰，吕 东，陈小云，章 镇，渠慎春 (南京农业大学园艺学院，南京 210095) 摘 要：RAR1和SGT1是植物R基因 (抗病基因，resistancegenes)介导的抗病防卫途径中的两个重 要信号元件，在R蛋白下游和活性氧产生之间发挥作用。为了研究湖北海棠MhRAR1和MhSGT1基因在 感病苹果品种植株内的表达特性及其抗病功能，利用农杆菌介导法将两种基因分别转入富士苹果。对Hyg 阳性植株进行PCR和RT-PCR检测，6个转MhRAR1株系和3个转MhSGT1株系呈阳性；两种转基因苹 果株系被苹果轮纹病病原菌侵染后，与对照相比都表现出抗氧化酶 (SOD／POD／CAT)活性迅速升高、MDA 含量变化较平缓的趋势，进一步说明RAR1和SGT1基因能够作用于苹果体内的活性氧反应和细胞膜活动 进程，对植株受到外部侵害后的抗性反应有促进作用。 关键词：苹果；湖北海棠；MhRAR1；MhSGT1；转基因；轮纹病；抗氧化酶活性 中图分类号：S661．1 文献标志码：A 文章编号：0513-353X (2013)12—2354—11 TransformationofM alus ×domesticawithM hRARIandMhSGTlGenes from M alushupehensisforResistanceofBotryosphaeriaberengeriana TUXu．tong，ZHANGShi-jie，LODong，CHENXiao—yun，ZHANGZhen，andQUShen—chun (CollegeofHorticulture，NanjingAgriculturalUniversity，Nanjing210095，China) Abstract：RAR1andSGT1wereidentifiedasrequired componentsin somesignalingpathways mediatedbydiseaseresistance(R)genesinmanyplantspecies，nadtheyfunctionbetweenthedownstream ofR proteinandreactiveoxygen．Tounderstandtheexpressioncharacteristicsandresistantfunction of MhRAR1andMhSGT1insusceptiblevariety，thetwogeneswerertansferredrespectivelyintotheFuji applebyAgrobacterium tumefaciens—mediatedmethod．AfterPCRandRT-PCRamplificationsonHyg positiveplants，6MhRAR1strainsand3MhSGT1strainswerescreened．InfectedbyBotryosphaeria berengeriana， the rtansgenic plna ts displayed more rapidly increase on allantioxidant enzymes (SOD／POD／CAT)activitiesandgentlechangingwavesofMDA content．ItfurtherillustratedthatRAR1 andSGT1actonthereactionofreactiveoxygenspeciesandtheprocessofmembranereaction，aswellas promotetheresistanttoexternalinfringedreactioninapple． Keywords：apple；Malushupehensis；MhRAR1；MhSGT1；trnasgenic；Botryo