《PCR检测引起苹果牛眼果腐病的明孢盘菌属3个致病种》.pdf

2013年第 3期 植物检疫PLANTQUARANTINE PCR检测引起苹果牛眼果腐病的 明孢盘菌属3个致病种 李 鑫 曹际娟 王有福 王卫芳 刘 冉 朱水芳 (1．辽宁出入境检验检疫局 辽宁大连 116001；2．广东出入境检验检疫局；3冲 国检验检疫科学研究院) DetectionthreepathogenicspeciesofNeofabraeawhichcausedtheApplebull’SeyerotbyPCR．LiXin，Cao JOuan ，WangYoufu，WangWeifang，LiuRan，ZhuShuifang。(1．LiaoningEntry—ExitInspectionandQuarantine Bureau，Dalian116001，China；2．GuangdongEntry—ExitInspectionandQuarantineBureau；3ChineseAcademyof InspectionandQuarantine) Abstract ApplebullSeyerotiscausedbypathogenicNeofabraeaspeciesincludingN．alba，N．perennans，N． malicorticisandNeofabraeaundescribedspecies．Fruitscarryingthisfungalquarantinediseaseareprohibitedfrom enteringChina．ThehostplantsforthepathogensincludeseveralRosaceaefuritsincludingappleandpear．Through thesymptomsandmorphology,itisdifficulttoidentifythespecies．Inthisstudy，accordingtothehighlyconserved geneof一tublin，wedisignedspecificprimerstodetectthethreepathogenicspeciesofNeofabraea．The554bp rfagmentsweredisplayedbyPCRandelectrophoresisdetection．W hiletheothertestedstrainshadnospecificbands． BasedOffPCR productrecycling，sequencingandblastanalysis，wecouldevenidentifyhtethreepathogenicspecies respectively~ Keywords Applebull’Seyerot；Neofabraeaspp．；PCR；detection 摘要 苹果牛眼果腐病是 由明孢盘菌属真菌 (Neofabraeaalba、N．perennans、N．malicorticis和 Neofabraeaundescribedspecies)引起的，被中国列为禁止入境的检疫性真菌病害。该病菌的寄主植 物包括苹果、梨在内的多种蔷薇科果树。根据症状特点和病菌形态特征很难鉴定到种。本研究根据明 孢盘菌属 ．tublin基因的高度保守性，设计针对明孢盘菌属3个致病种 (Neofabraeaalba、N．perennans、 J7、，．malicorticis)的特异性引物，进行PCR扩增及 电泳检测，表明该引物对3个致病种均可扩增出554bp 片段，而对其他参试菌株无特异扩增。此外，对PCR产物进行回收、测序及Blast分析，可根据序列比 对结果准确地鉴定到3个致病种的水平。 关键词 苹果牛眼果腐病 ；明孢盘菌属 ；PCR；检测 中图分类号 s41 苹 果牛 眼果 腐病 (Bull’SEyeRotonApple) 多在苹果、梨等上发生，在欧洲被看作是同一个 在欧美苹果产 区存在历史长达百年 …，被 中国 种，而在美洲被认为是不同的种，但引起的症状 列为禁止入境的检疫性真菌病害 [2】。因其近年 基 本相 似 [6,71；N．alba仅1973年 在华 盛 顿苹 果 来 国外发生普遍 ，经济损失影响很大，传入风险 产区