生物化学基因载体.ppt

第十三章 核酸代谢 第三节 遗传工程 第一个哺乳动物的克隆——Dolly羊 遗传工程的概念 遗传工程 （genetic engineering），也称基因工程。 是指将不同的DNA片段（如基因等）按人们的设计方案定向连接起来，并在特定的受体细胞中与载体一起得到复制与表达，使受体细胞获得新的遗传特性。 基因工程的用途 利用DNA重组技术大量生产一些在正常细胞代谢中产量很低的物质，如酶类； 定向改造生物基因组结构，使它某些具有经济价值的功能得以显著提高； 将DNA重组技术应用于基础研究。 基因载体 含义：能够把外源DNA片段带入受体细胞并 进行稳定遗传的DNA或RNA分子．  载体的基本条件 质粒载体 质粒是一种广泛存在于细菌细胞中染色体以 外的能自主复制的裸露的环状双链DNA分子，比病毒更简单。在霉菌、蓝藻、酵母和一些动植物细胞中也发现了质粒，目前对细菌的质粒研究得比较深入。 ①分子量小(2.69kb),但能携带较大的外源片段； ②拷贝数多,在每个宿主细胞可达500个； ③酶切位点多，克隆方便； ④具有α-互补显色表型,便于检测。 λ噬菌体（30kb） λ噬菌体的电子显微镜照片 λ噬菌体载体构建的策略 a)去除部分限制酶识别位点 b)去除非必需区DNA c)插入可供选择的标记基因 此外，还有两个很有用的载体是和 谢谢观看！ * * 二、基因载体 食品121 冼雅怡 1205300045 书本P321 MCS Marker Foreign gene ①有独立的复制原点(ori)，能独立地自我复制，而且能带动外源DNA一起复制。 ②具有多种限制性酶的切点，用于连接外源DNA 片段。 ③载体上的限制酶酶切位点对于任何一种限制酶来说只能有一个。 ④具有一个选择标记基因。 质粒载体 大肠杆菌质粒载体，枯草杆菌质粒载体，酵母质粒载体，农杆菌质粒载体，蓝细菌质粒载体 噬菌体质粒载体 双链DNA噬菌体载体：λ 单链DNA噬菌体载体：M13，T3，T7 病毒载体 植物病毒载体CaMV（花椰菜花斑病病毒） 动物病毒载体 SV40（猿猴空泡病毒） 质粒载体 λ噬菌体的组成 结构：外壳蛋白 DNA形态：头部 尾部 噬菌体M13 装配型质粒 有兴趣的同学可以自己查阅一下相关的资料和文献哟~