生物选修复习——江苏生物高考复习.ppt

获取目的基因方法 1、从供体细胞直接获取 2、从基因组文库中获取 3、利用mRNA反转录形成 4、利用PCR扩增技术 5、人工合成 载体的组成 自查练习2 自查练习3 ⑵.单克隆抗体概念 1 . 受 精 作 用 选B A、错误，因为改良缺陷基因，不可能实现把所有 的体细胞都进行改良。而且，诱变是不定向的。 基因治疗指的是，导入正常的基因，而不是替换掉 以前的 B、正确，DNA分子杂交，能判断两个DNA的相似 性，从而找到特定的致病片段 C、错误，一种基因，作为探针只能检测携带这种 基因的病毒，而且一般只能检测核酸为单链的病毒 D、错误，因为遗传密码有同一性，所以原核动物 和真核动物的基因是可以人为进行流通的 过程 离体的植物器官、组织或细胞 愈伤组织 根、芽 植物体 外植体 脱分化 植物激素：细胞分裂素、生长素 再分化 组培条件： 含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的pH、适时光照等。 1.植物组织培养 植物A细胞 植物B细胞 去 壁 原生质体A 原生质体B 原生质体 融合 融合体 再生壁 杂种细胞 细胞分裂 愈伤组织 杂种植株 去壁的常用方法： 酶解法（纤维素酶、果胶酶等） 原生质体融合方法： 物理法：离心、振动、电刺激等 化学法：聚乙二醇（PEG） 过程示意图 2.植物体细胞杂交 细胞悬浮液 10代细胞 50代细胞 无限传代 原代培养 传代培养 细胞株 细胞系 原代培养与传代培养、细胞株与细胞系 多数组织细胞固定在表面生长和分裂。 随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖 遗传物质改变 动物细胞培养液： ⑴液体培养基; ⑵成分中有动物血清等 3.动物细胞培养 4.细胞核移植 供体 采集卵母细胞 减Ⅱ中期 卵母细胞 去核 去核 卵母细胞 供体细胞 培养 激活 分裂、分化 胚胎移植 克隆奶牛 重复获得更多克隆牛 ⑴、诱导动物细胞融合的方法 物理法： 仙台病毒 紫外线 丧失感染活性（不感染细胞） 保留融合活性 （诱导细胞融合） 聚乙二醇（PEG） 电刺激…… 灭活病毒 化学法： 生物法: 5.单克隆抗体的概念 单个细胞 化学性质单一、特异性强 无性繁殖 B淋巴细胞：寿命短,分泌特异性抗体 骨髓瘤细胞：寿命长 杂交瘤细胞：寿命长，单克隆抗体 ⑶.单克隆抗体特性 均一性：纯度很高的均一性抗体 专一性：只对抗原某一抗原决定簇起反应 大量产生及稳定性：杂交瘤细胞能无限繁殖…… 由单个B淋巴细胞经无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，所产生的化学性质单一、特异性强的抗体。 单： 抗体： 克隆： 特异性强、灵敏度高、产量大 精、卵相遇 顶体反应(顶体酶释放) 顶体酶溶解透明带 溶解卵丘细胞(穿越放射冠) 穿越透明带，接触卵黄膜 透明带反应 (第一道屏障) 精子外膜与卵黄膜融合 精子进入卵 卵黄膜封闭作用(第二道屏障) 尾部脱离核膜破裂，形成雄原核 激活卵子完成减Ⅱ，排出第二极体，形成雌原核 发育移动 接触合并 形成受精卵 * 解旋酶 反转录酶 RNA聚合酶 DNA聚合酶 DNA连接酶 DNA 酶 限制酶 功能 特异性地切断DNA链中的磷酸二酯键 即DNA水解酶，是将DNA水解的酶 在DNA复制时，连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的 磷酸二酯键，需要一条DNA链作模板 连接DNA片段之间的磷酸二酯键，不需要模板 连接RNA片段与单个核糖核苷酸之间的 磷酸二酯键，需要模板 作用于磷酸二酯键 断开氢键 B 下列关于DNA连接酶作用的叙述，正确的是（ ） A、将单个核苷酸加到某DNA片段末端，形成磷酸二酯键 B、就断开的两个DNA片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键 C、连接两条DNA链上碱基之间的氢键 D、只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间连接起来，而不能将双链DNA片段末端之间进行连接 种间基因交流 基因多少 基因中内含子 基因中启动子 文库大小 基因组文库 cDNA文库 文库类型 小 大 无 有 无 有 某生物的部分基因 某生物的全部基因 可以 部分可以 ⑴.基因组文库与cDNA文库的构建 ⑵.利用PCR技术扩增目的基因 1.获取目的基因 ▲要用同种的限制酶切割 ②目的基因 ①启动子 ③终止子 ④标记基因 ▲ 鉴别受体细胞中是否含有目的基因 筛选含有目的基因的细胞 ▲ RNA聚合酶识别和结合的部位 2.基因表达载体组成 ⅰ.转化： ⅱ.方法 导入 植物细胞 导入 动物细胞 导入 微生物细胞 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 ——显微注射法 ——Ca2+处理 目的基因进入受体细胞内，