红细胞计数().ppt

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思考 出生后造血,红细胞生成部位 ,红细胞破坏部位 。 正常情况下,成人外周血中是否存在有核红细胞? 网织红细胞只存在于骨髓中。 成熟红细胞只存在于外周血中。 计数红细胞时,为何使用等渗稀释液? 在计数红细胞时,还能看到哪些细胞? 这些细胞是否会对红细胞计数结果产生影响? 仪器法计数红细胞时,是否真正认识红细胞而计数? RBC与Hb测定用于贫血诊断 * * * * * * * * * * * * * 血红蛋白(hemoglobin,Hb ) 在有核红细胞及网织红细胞内合成的。 是红细胞内与氧气结合的运输蛋白。 Hb在成熟红细胞内分布特点(近胞膜处多,中心部少)决定了红细胞的双凹圆盘形状。 合成速度受促红细胞生成素(EPO)与雄激素调节。 红细胞A 红细胞B Hb (四聚体) 珠蛋白 血红素 2条α链 2条非α链 原卟啉 铁原子 血红蛋白组成 血液中血红蛋白的存在形式 存在形式 所占比例 还原血红蛋白(Fe2+ ) 正常成人99% 氧合血红蛋白 碳氧血红蛋白 硫化血红蛋白 高铁血红蛋白(Fe3+ ) 1% Hb测定即测定血液中各种血红蛋白的总浓度。 血液的物理特性:比重法,折射仪法 Hb的分子组成:全血铁法 Hb与O2可逆性结合:血气分析法 Hb衍生物光谱特点:HiCN,SDS-Hb等 Hb检测原理 HiCN法检测原理 Hb( Fe2+ ) K3Fe(CN)6 Hi (Fe3+) CN - HiCN HiCN测定法 计算 直接计算(符合WHO标准的分光光度计) Hb= A×64458÷44000×251=A×367.7 以 HiCN参考液绘制标准曲线,利用吸光 度A在标准曲线上查出Hb浓度 方法学评价 缺点:试剂有毒、高WBC造成试剂混浊、HbCO 转化慢、不能测SHb。 HiCN测定法(参考方法) 优点:操作简单,反应速度快,产物稳定,便于质控。 方法学评价 优点:操作简单,试剂无毒,结果准确,重复性好。 缺点:SDS质量差异大;消光系数未定,不能直接计算Hb浓度;不能测定SHb;SDS破坏白细胞。 SDS-Hb测定法(HiCN替代方法) 质量保证(比色法) 标本:引起血清浊度增加的因素致Hb假性增高。 器材及试剂:定期校准仪器,选用合格的微量采血管和刻度吸管,保证试剂质量。 技术操作:控制技术误差。 废弃物:妥善处理废液。 参考区间 成年男性:120~160 g/L 成年女性:110 ~150 g/L 新生儿:170~200 g/L Hb存在年龄 与性别的差异 临床意义(同红细胞计数) 判断贫血程度优于红细胞计数 临床应用注意事项 Hb和RBC不一定正确反应全身红细胞总容量的变化。 某些贫血, Hb和RBC减少程度可不一致,同时测定Hb和RBC,对诊断更有意义。 贫血程度的判定 分度 Hb含量 症状 轻度: 91g/L~正常值下限 症状轻微 中度: 61g/L~90g/L 活动后心悸、气促 重度: 31g/L~60g/L 休息时也有心悸、气促 极重度: 30g/L 常合并贫血性心脏病 我晕 晕死 小结 Hb测定方法学评价 RBC显微镜计数法原理 RBC计数的临床意义 HiCN测定法原理 * * RBC起源于骨髓造血干细胞,在红细胞生成素(EPO)作用下向着红细胞系统分化,经过原红细胞、早幼红、中幼红、晚幼红细胞,最后脱核形成网织红细胞(RL),从原红细胞到网织红细胞这一过程在骨髓中进行,网织红细胞再经过48小时即完全成熟,成熟红细胞进入外周血发挥生理功能。 * 成熟RBC的直径为6.7~7.7μm,正面呈圆盘形,侧面呈双凹形状(结合图片进行讲解)。其主要的生理功能是作为呼吸载体携带氧气至全身各组织。成熟RBC寿命约120天,衰老的红细胞在脾脏破坏,分解为铁、珠蛋白和胆红素(结合图片进行讲解)。 * 正常情况下,红细胞的生成和破坏处于动态平衡中,因而血液中红细胞的数量及质量保持相对稳定。如何获得某人红细胞的数量情况呢?我们可以采集他的血液做红细胞计数检查。 * * * * * * * * * * RBC RBC RBC 第二章/第一节红细胞检查 临检教研室 陈亚芹 第二章/第一节红细胞检查 一、红细胞计数 二、血红蛋白测定 正常情况下,红细胞生成与破坏保持动态平衡,血液中红细胞数量保持在相对恒定的范围。

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