细胞因子与病理过程.ppt

细胞因子cytokines concept：是由细胞产生和分泌的低分子量的多 肽类介质 effect：参与调节细胞生长、分化、器官发育; 炎症、免疫、肿瘤、损伤、修复等许多病理及生理过程 来源： 血管内皮细胞、WBC（中性、单核巨噬细胞、LC）、纤维母细胞、神经组织、 平滑肌细胞、软骨组织、肿瘤细胞等 Wnt通路中的关键分子与肺癌侵袭转移 王恩华 中国医科大学 研究背景 1 在中国肺癌的发生率在过去的30年里 上升了465%，死亡率居恶性肿瘤之首 每年死于肺癌的患者约45万人，其中约有40万人死于肺癌的转移 因此揭示肺癌侵袭转移的分子机制和寻找治疗关键靶点，具有重要意义  β-catenin在正常支气管上皮细胞表现为膜表达，而在 NSCLC 中主要表现为细胞浆或核内的蓄积，这种蓄积与NSCLC 的低分化和淋巴结转移相关 我们用SSCP和直接测序法检测了100例NSCLC 中β-catenin第三外显子突变情况，结果发现β-catenin 的第三外显子无一例突变 Am J Clin Pathol. 2006, 125(4):534-541 是什么原因造成了β-catenin 在肺癌细胞中的蓄积？  转染Axin可明显抑制肺癌细胞的侵袭转移和增殖能力 我们将新鲜的NSCLC组织经1 gray X-ray照射后发现Axin的蛋白和mRNA均出现了明显的上调，同时Caspase-3的表达也出现了明显的上调 Axin诱导细胞凋亡的机制是什么？转染Axin或不与p53结合的△-Axin，再用p53抑制剂PFT-α或JNK抑制剂SP处理 我们意外地发现：过表达Axin可以下调TCF-4的转录，但机制不清 我们为了探讨这个问题，构建了Axin不能与β-catenin结合，Axin不能与p53结合，以及Axin既不能与β-catenin也不能与p53结合的突变体 转染Axin在下调β-catenin 表达的同时可明显下调TCF-4的表达，但转染Axin △β-ca即保留了p53作用时却不能下调β-catenin和TCF-4，但由于BE1细胞系是p53突变型细胞系，因此尚不能确定Axin是否具有通过p53下调TCF-4的作用因此，我们向BE1细胞中转染了野生型p53，结果显示单纯转染野生型p53可以下调TCF-4，但共转染Axin △β-ca和p53后TCF-4并没有出现进一步下调，表明Axin并不能加强p53下调TCF-4的作用 二、DVLs对Wnt通路的调节作用 非小细胞肺癌组织中存在DVL-1和3的过表达，其表达与高TNM分期、低分化有关 我们发现：过表达Dvl-1可以明显的上调β-catenin的蛋白水平，同时激活TCF-4依赖的转录活性，表明Dvl-1主要参与经典的Wnt通路而过表达Dvl-3却不能明显上调β-catenin水平和TCF-4依赖的转录活性但无论过表达Dvl-1还是Dvl-3均能明显增强肺癌细胞的侵袭转移能力 我们发现：转染Dvl-3能明显上调肺癌细胞中磷酸化的 JNK和p38水平 我们发现：过表达DVL-3上调p120mRNA水平 ChIP分析证实了转录因子Pax6可以直接与p120ctn的启动子区结合 p120ctn在肺癌中的异常表达及意义 肺癌中p120ctn-1A、3A和E-cadherin的表达下调与small GTP酶过表达相关 敲除p120ctn后，Pulldown结果证实cdc42、Rac1活性增强，但RhoA活性下降 敲除p120ctn后S期细胞比例增加、侵袭和转移能力增强 p120ctn-1A 和 3A都可抑制肺癌细胞增殖、侵袭和转移 但是p120ctn-1A 抑制肺癌细胞侵袭转移的能力强于3A而p120ctn-3A 抑制增殖的能力明显强于1A 我们发现： Kaiso 过表达与NSCLC不良预后相关 无论是在肺癌原发灶和淋巴结转移灶中，Kaiso 和p120ctn总是呈现同样的表达部位 干扰p120后Kaiso核内增多，核浆蛋白分离进一步验证Kaiso在核内分布增多 结论： Axin、 DVL、 p120ctn、Kaiso在肺癌侵袭转移中发挥着重要的调控作用 β-catenin在NSCLC中蓄积是由于Axin表达下调 所致，过表达Axin或用X线照射肺癌组织上调Axin的表达，都可明显抑制肺癌的侵袭转移，促