动物实验基本技术与方法.ppt

动物实验基本技术和方法 主要内容 一、 实验前准备 二、实验动物抓取与固定 三、年龄的大致判断 四、性别、发情、与妊娠鉴定 五、编号和标记 六、分组 七、去毛 八、给药途径与方法 九、采血方法 十、其他体液采集 十一、麻醉方法 十二、处死方法 十三、动物病理检查 一、 实验前准备 理论准备：了解动物实验基础知识 制定研究计划和方案 查阅关于实验方法的参考文献 条件准备：仪器、器械、药品 运输 动物实验和饲养场所 二、实验动物抓取和固定 （一）小鼠 小鼠固定器固定 （二）大鼠 大鼠固定盒固定 （三）豚鼠 （五）犬 三、年龄的大致判断 （一）大、小鼠 1、根据形态鉴定日龄（大、小鼠情况基本一样） 2. 根据体重鉴定日龄 ⑴ 小鼠日龄与体重的对应 ⑵ 大鼠日龄与体重的对应 （二）豚鼠 一般老年豚鼠牙齿和趾爪长，被毛稀疏无光泽，眼神呆滞，行动迟缓。而年轻豚鼠牙齿短白，爪短软，眼睛圆亮，行动敏捷，被毛有光泽，且紧贴身体。同样，也可根据体重来推断大致年龄。同日龄豚鼠，雌性体重略高于雄性。与大鼠一样，其体重受多种因素的制约。实验对年龄要求比较严格时，必须由卡片记录提供准确年龄。 四、性别、发情、与妊娠鉴定 （二）兔的性别鉴定 初生兔仔如阴部孔洞扁圆而略大于肛门，且与肛门相向、距离较近的是母兔；孔洞呈圆形而略小于肛门，孔洞向前而距肛门较远的是公兔。 三月龄以上的兔子，只要看有无阴囊即可区别公母。 （三）大、小鼠发情鉴定 小鼠性周期阴道分泌物涂片变化 （四）妊娠鉴定 1、阴道栓法（大、小鼠、豚鼠） 2、外部检查法 3、摸胎法 4、阴道检查法 5、直肠检查法 6、超声波检查法 7、孕酮含量测定法 五、编号和标记 1、染色法：浅色动物 3.5-5％苦味酸溶液（黄色） 0.5%中性红或碱性品红溶液（红色） 煤焦油酒精溶液（黑色） 龙胆紫溶液（紫色） 2、打耳孔法：小型动物 3、剪趾法：小型动物 4、剪尾法：大、小鼠，仅限与两组间区分 5、烙印法：刺号钳，中、大型动物 6、针刺法：中、大型动物 7、号牌法：耳标签、项圈、腿圈，中、大型动物 8、剪毛法：大动物 9、笼子标号 六、分组 随机化分组：避免人为影响 例：将14只小鼠随机分成两组。 ①先将小鼠编为I～14号， ②在随机数字表上任点一数，按任意方向连续抄14个随机数字。 编排如下： 动物编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 随机数字 16 22 77 94 39 49 54 43 54 82 17 37 93 23 归 组 B B A B A A B A B B A A A A ③奇数代表A织，偶数代表B组 ④A组： 3 5 6 8 11 12 13 14 B组： 1 2 4 7 9 10 ⑤调整分组：接刚才随机数字23继续抄表得随机数字78，用78除以8（因为需要把A组的8个数字调整掉一个），得余数6，所以把A组的第6个动物，即12号动物调整到B组 ⑥ 最终分组 A组： 3 5 6 8 11 13 14 B组： 1 2 4 7 9 10 12 例：12只大鼠随机分为3组 ①大鼠编号1~12 ②在随机数字表上任点一数，按任意方向连续抄12个随机数字。 ③每个数分别用3除，记录余数， ④ 根据余数分组 大鼠编号：1， 2， 3， 4， 5， 6， 7， 8， 9， 10， 11， 12 随机数字：08，27，01，50，15，29，39，39，43，79， 69，10 余数： 2， 0， 1， 2， 0， 2， 0， 0， 1， 1， 0， 1 组别： B， C， A， B， C， B， C， C， A， A，C， A ⑤ A：3，9，10，12 B；1，4，6 C：2，5，7，8，11 ⑥调整分组：接刚才随机数字10继续抄表得随机数字61，用61除以5（因为需要把C组的5个数字调整掉一个），得余数1，所以把C组的第1个动物，即2号动物调整到B组。 ⑦最终分组 A：3，9