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病原病理教研室 消毒与灭菌 微生物的分布 1、土壤中的微生物： 多为非致病菌，少数有致病性。 芽孢菌致病；药材霉变。 2、水中的微生物： 主要来自人和动物的排泄物、污物。 常引起消化道传染病。 3、空气中的微生物： 来源于人畜呼吸道的飞沫及飘扬的尘埃； 常引起呼吸道传染病。 基 本 概 念 灭 菌 消 毒 防 腐 无 菌 无菌操作 物 理 方 法 (一)热力消毒灭菌法 (二)辐射杀菌法 (三)滤过除菌法 (四)超声波杀菌法 (五)干燥和低温抑菌法 干热灭菌法 1、焚烧法：用于废弃物品和动物尸体等。 2、烧灼法：用于接种环、试管口的消毒。 3、干烤法：160~170 ℃，2小时 用于玻璃器皿、某些粉剂药物的消毒。 干 燥 箱 湿热灭菌法 1、巴氏消毒法：用于牛奶、酒类的消毒 61.1-62.8℃，30 min或71.7℃，15-30sec 高压蒸气灭菌锅 干热灭菌法与湿热灭菌法的区别 同一温度、相同时间内，湿热灭菌法的灭菌效果较干热灭菌法好。 辐射杀菌法 1、日光与紫外线 机理：损坏DNA构型-细菌死亡或变异 特点：200~300nm具有杀菌作用，穿透力弱 紫外线杀菌车 超声波杀菌法 可裂解细菌，尤其对G+更敏感。 主要用于粉碎细胞，提取细胞组分或制备抗原等。 干燥与低温抑菌法 化学方法的杀菌机制 机制： ① 使菌体蛋白质变性或凝固 ② 破坏或改变蛋白质与核酸功能基团 ③ 改变细胞壁的通透性 消毒剂的主要种类、作用机制及用途 1 、酚 类 作用：菌体蛋白凝固；损伤细胞膜；灭活酶类。 浓度：石炭酸为3%- 5%、来苏儿为2%。 用途：地面、器具表面和皮肤的消毒。 2 、醇 类 作用机制：使菌体蛋白变性与凝固；干扰细菌代谢。 浓度：乙醇70%-75%。 用途：用于皮肤的消毒和体温计等的浸泡。 3 重金属盐类：使蛋白质变性和沉淀；酶活性丧失。 （1）2%红汞：皮肤、粘膜和小创伤 （2）0.05-0.01%升汞：非金属器皿 4 氧化剂：氧化作用；使蛋白质变性。 （1）0.1%高锰酸钾：皮肤、尿道、水果 （2）3%过氧化氢：创伤、皮肤粘膜 （3）2%-2.5%碘酒：皮肤消毒 （4）0.2ppm-0.5ppm氯：饮水和游泳池 5、表面活性剂 损伤细胞膜；影响酶的活性；蛋白质沉淀 （1）0.05%-0.1%新洁尔灭：皮肤粘膜、手术器械 （2）0.05-0.1%杜灭芬：伤口冲洗，金属器械等 6、烷化剂： 使菌体蛋白和核酸的烷基化 缺点：有一定的毒性 （1）10%甲醛：物品表面、空气 （2）2%戊二醛： 精密仪器、内窥镜等 影响消毒灭菌效果的因素 1、消毒剂的性质、浓度与作用时间 消毒剂在低浓度时，常为防腐剂。 2、微生物的种类 3、温度 4、酸碱度 5、有机物 环境中有机物的存在，可减弱消毒效果。 复习思考题 1、酒精消毒最适宜的浓度是： A、100% B、95% C、75% D、50% 2、杀灭细菌芽孢最有效的方法是： A、紫外线照射 B、干烤灭菌法 C、高压蒸气灭菌法 D、煮沸法 3、实验室中常用干烤法灭菌的物质是： A、玻璃器皿B、橡皮手套C、手术刀D、血清 复习思考题 4、湿热灭菌法中效果最好的是： A、高压蒸气灭菌法 B、煮沸法 C、巴氏消毒法 D、流通蒸气灭菌法 5、判断消毒灭菌是否彻底的主要依据是： A、繁殖体被全部消灭 B、芽孢被全部消灭 C、鞭毛蛋白变性 D、菌体DNA变性 6、杀死物体上病原微生物的方法，称为： A、消毒 B、灭菌 C、防腐 D、抑菌 * * 基 本 概 念 物 理 方 法 化 学 方 法 影响消毒灭菌效果的因素 复习思考题 杀灭物体上所有微生物(包括芽孢)的方法。 杀死物体表面或环境中病原微生物的方法。（一般消毒剂只对繁殖体有效） 防止或抑制体外微生物生长繁殖，细菌一般不死亡。 物体中不含活的微生物。 防止微生物进入人体或其他物品的各种操作。 干热灭菌法 湿热灭菌法 ——用物理阻留方法除去细菌。 2、煮沸消毒法： 100℃、5-10min，可杀死细菌繁殖体。 3、流通蒸气消毒法： 100℃、15-30min，可杀死细菌繁殖体。 4、间歇蒸汽灭菌法： 100℃，15-30min，37℃过夜（3次） 5、高压蒸汽灭菌法： 121.3℃，1.05Kg/cm2,15-30min 原因： 1 细菌蛋白质在有水环境中易凝固变性。 2 湿热穿透力强。 3 湿热蒸气有潜热存在。 2、电离辐射：包括X射线和γ射线 机制：干扰DNA的合成；破坏细胞膜；产生过氧化氢等。