交叉配血知识.ppt

意识决定 意识决定 * * * 交叉配血 知识讲座 * * RBC表面有丰富唾液酸，在中性环境中带负电荷，互相分离。可通过缩短细胞间距，以及在致敏细胞上的抗体之间搭桥使RBC凝集。 凝集一般为二个步骤 抗体吸附于RBC抗原上成为致敏状态 致敏RBC凝集形成块状 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? * * 标本的采集及要求 一 血型 二 不规则抗体的筛选 三 交叉配血 四 一 二 三 四 * * 标本的采集与要求 * * 1.标本要新鲜: 前三个月内输血或妊娠:配血试验标本抽取48h,避免因回忆反应产生的抗体漏检。 新近的输血或妊娠：可引起意外抗体迅速出现,如果对病人的输血史或人身史不明,使用的标本必须是输血前48h内抽取的。 血量约为5ml 。 2.使用右旋糖酐、pvp等： 治疗前抽取标本备用,防止RBC缗钱状凝集的干扰 标本要具有代表性，能代表患者目前状况 * * 3.24小时内输了12u血后： 可输注未经交叉配血的ABO、RH同型的血液,因为原始交叉配血用的血清已不能代表患者血清的情况。 4.防止血样的稀释和溶血的产生： 溶血标本一般不使用,因为血清中游离血红蛋白可掩盖在输血前实验中抗体反映引起的溶血 5.标本标识：唯一性标识无误、与输血申请单一致 6.使用血浆标本：应排除纤维蛋白原的干扰 7.输血后标本保存：2-8℃,至少一周。 * * 血 型 1. 红细胞悬液的配制 2. 离心力的标准 3. 离心后结果观察 4. 盐水试验 5. 正反定型结果不一致原因及处理 * * 1.红细胞悬液的配制 洗涤 洗涤目的: 去除RBC表面物质 少量的血浆蛋白 已溶解红细胞的基质（有竞争抗体的作用） 抗凝剂（有抗补体的作用） 至少要用大量生理盐水洗一次 浓度 2%：一般用于抗体效价的测定 5%：一般用于血型鉴定、配血试验、抗球蛋白试验等大多数血型血清学试验 10%：一般用于测定抗体的亲和力试验 * * 2. 离心力的标准 不同规格离心机，力矩不同，统一离心转速，但没有统一离心力。 离心转速换算公式： RCF = 1.118 × 10-5 × (rpm) 2× R (cm) 3. 离心后结果观察注意事项 将试管成30-45℃角拿在手上，细胞扣朝上，手腕轻轻用力，用液体去冲细胞扣。 切不可用力使劲摇试管，那样凝集颗粒会被摇散，弱凝集则会误判为阴性。 - 细胞成细沙状沿试管壁流下 + 细胞成块状或成齿状沿试管壁流下 * * 常用的记录符号及所示的凝集强度 4+ 一个大的凝集块,背景透明,无游离细胞 3+ 数个大凝集块,背景透明,无游离细胞 2+ 许多小凝集块,肉眼可见,大小均匀,背景基本透明,有游离细胞 1+ 很小的凝集块,肉眼可见,背景不透明,游离细胞较多,需要用显微镜观察 W+ 微小凝集块,肉眼很难看清,背景混浊,要用显微镜观察 O 无凝集,无溶血,全部是游离细胞,要用显微镜观察 PH 部分溶血 H 完全溶血 WF 混合外观 * * 4.盐水试验 多采用立即离心法 正确的操作是：RBC悬液加到血清后立即离心并观察结果 反应时间过长而延误离心对ABO血型系统的抗体检出影响 室温2分钟后离心 可能使3+～4+的凝集减弱为0+ ～ 1+,并有溶血 室温5分钟后离心 原有凝集可能消失,并有溶血 有的标本延迟离心 原有凝集会变为既不凝也不溶血,难以发现ABO血型的不配合。（多发生在O型人的血清抗体与A型、B型或AB型红细胞反应的试验中,发生率为2%-3%.发生机制是反应强的抗A、抗B和抗原强度强的A、B抗原作用,补体C1在有Ca2+存在的条件下,固定到红细胞膜上,妨碍了红细胞的凝集,进一步可能引起溶血） 解决的方法： A:血清与红细胞混合后立即离心。 B:用血浆或灭活的血清做试验 C:用EDTA盐水配制红细胞悬液, D:稀释血清 * * 加样时先加血清再加红细胞，以避免漏加； 抗体和抗原的比例一般为2：1。 必须要做正反定型实验才能确定血型。 正定型试验有条件可加做抗AB（检测弱A、弱B ） 反定型一定要加做O细胞,（发现不规则抗体） * * 5.正反定型结果不一致 原因：技术、受检红细胞或血清本身 （1）技术和管理错误 器材不洁 —— 假阳 试剂污染或不足 —— 假阳 标本和试剂搞错 —— 假阳 、假阴 离心过度或不足 —— 假阳 、假阴 结果记录或判断错误 —— 假阳 、假阴 漏加试剂 —— 假阴 阳性反应产生溶血现象未能识别——假阴