仪器分析-UV-VIS.ppt

可进行分子的定性和定量分析 可用于一些物理化学常数的测定（如平衡常数等） 仪器结构简单、价格便宜 应用范围广泛（无机离子、有机化合物、生物大分子分析等） 分子吸收光谱的分类和特征 紫外-可见 电子光谱 ?Ee =1 - 20 eV 红外 振动光谱 0.05-1 远红外 转动光谱 0.005-0.05 分子的电子光谱的特点： 1 在波长范围内按一定强度分布的谱带 —带光谱 2 波长位于紫外-可见区 红移和蓝移 三、影响紫外-可见光谱的因素 共轭效应：?电子共轭体系增大，波长红移、吸收增强； 取代基影响：能够引起?电子永久性转移的取代基使波长红移（助色团）； 溶剂影响：一般情况下分子的激发态极性大于基态，因此溶剂极性增大有利于激发态稳定，能量降低，波长红移。 四. 定性和定量分析依据 （1）定性分析依据： 可根据吸收光谱曲线的形状，即曲线上吸收峰的数目，峰所对应的波长及峰的相对高度来进行定性分析。 （2）定量分析的依据： 根据某一特征峰的高度与物质浓度成正比的关系来进行定量分析。 A＝lg(I0/It)= εb c 第三节 光的吸收定律 光的吸收定律 A＝lg（I0/It)= εb c A：吸光度 --- 溶液对光的吸收程度 b：液层厚度(光程长度,cm) c：溶液的摩尔浓度，mol·L－１ ε：摩尔吸光系数，单位L·mol-1·cm-1；在数值上等于浓度为1mol/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度； A＝lg（I0/It)= a b c c：溶液的浓度，g ·L－１ a：吸光系数，L ·g－１ ·cm－１ 浓度为1 g/L、液层厚度为1cm时 该溶液在某一波长下的吸光度  a——ε 的关系： a =ε/M （M为摩尔质量） 摩尔吸收系数ε的讨论 2.透光度T 应用举例 应用举例 3. 朗伯-比尔定律偏离的原因 （1）物理性因素 非单色光作为入射光引起的偏离 讨论: 讨论: A总 =A1 + lg2 - lg(1＋10-?εbc )  (2) 化学性因素 思考题 UV-VIS的理论灵敏度为 4.4 x 10-8 M，这一极限值能够从哪几个方面突破？请你提出有效的方法。 T在0.2—0.65之间时，浓度相对误差最小，最佳读数范围。 用仪器测量时，应尽量使溶液透光度在0.2—0.65（吸光度A=0.7—0.2） 化学发光 荧光棒中的化学物质主要由三种物质组成：过氧化物、酯类化合物和荧光染料。 荧光棒发光的原理就是过氧化物和酯类化合物发生反应，将反应后的能量传递给荧光染料，再由染料发出荧光。 目前市场上常见的荧光棒中通常放置了一个玻璃管夹层，夹层内外隔离了过氧化物和酯类化合物，经过揉搓，两种化合物反应使得荧光染料发光。 Development of nanoparticle labels to DNA and Protein-chips Chemiluminescence Sensors based on Enhanced emission on Rare-earth doped nanoparticles 一、络和物组成的测定 摩尔比率法 等摩尔系列法 斜率比法 平衡移动法 第四节 紫外-可见分光光度法的应用 定性分析与定量分析（略） 摩尔比率法测定络和比： mM+nR MmRn 配制：不同CR/CM的系列溶液：如CR/CM=1，2，3，……n 分别测吸光度：A1, A2 ,A3……An, 作A~ CR/CM曲线 A CR/CM 0 D 络和比 M未被完全络和 有过量的R A0 A’ 若络合物稳定性差，络合物解离使吸光度下降，转折不明显，据此可以测定络合物不稳定常数。 设：络合物解离度为 ?，不解离时转折处浓度为 C CMmRn = (1- ?)C CM = m ? C CR = n ? C 则络合物不稳定常数为 ? = A0 - A’ A0 K = [CM]m[CR]n (m ?C)m(n ?C)n mmnn ?m+n Cm+n-1 [CMmCRn] (1- ?)C 1- ? = = 二、酸碱离解常数的测定 HB H++B- Ka = [H+] [B-] [HB] (1) pKa=pH+lg [HB] [B-] 设：b=1cm A=A HB +AB- A=?HB（c- [B-]) +?B-[B-] = ?HBc+[B-] (?B-- ?HB) 同样由（2）得： A=?HB[HB]+ ?B-(c-[HB]) = ?B-c+[HB] (?HB- ?B-) [B-] = ?HB A -?HB c ?B-- 则：A=A HB +AB-=?H