玉米须中多糖的提取鉴别与含量测定论文.docxVIP

吉林化工学院 化工与材料工程学院 综合与设计性化学实验 实验类型： 设计 实验题目：玉米须中多糖的提取 、鉴别与含量测定 班 级：化工1003 学姓 名： 任云霞 实验日期： 2012-10-18 摘要 目的为掌握天然产物的提取鉴别和含量的测定方法，研究了从玉米须中提取多糖的方法，并以多糖的提取率为指标进行评价。采用了热回流的方法提取玉米须中的多糖，提取时间为一小时。对所提取的多糖进行验证，并且在该提取条件下通过测定吸光度，计算玉米须中多糖的提取率。结果1ｇ玉米须回流提取多糖的提取率为 。结论 该提取方法采用全物理过程，无和化学变化及污染，是提取玉米须多糖类物质的有效途径。 关键词：玉米须；多糖；热回流提取；鉴别；含量测定 前言 玉米须为禾本科玉属植物。玉米的花柱及柱头，其味淡、性平，有清血热、利等功效（南京药学院，1980）。我国是养殖大国，玉米作为能量饲料在我国的种植面积逐年扩大，其副产品玉米须产量也越来越大，因此，利用玉米须提取可溶性多糖，有利于玉米须资源的充分利用，提高经济效率。郑鸿雁等（2004）研究发现，玉米须多糖具有调节小鼠体液免疫功能和增强小鼠巨噬细胞吞噬功能的作用。目前，可溶性玉米须多糖因其具有多种生物活性而逐渐引起关注，本实验对玉米须多糖进行提取测定，为其实际开发与利用提供一定的依据。 目的与要求 1、通过自主设计玉米须多糖的分布提取, 掌握天然产物的提取工艺与综合设计能力。 2、通过对玉米须多糖的鉴别和含量测定，初步掌握天然产物的鉴别和含量测定的方法。 基本原理 多糖又称多聚糖(polysaccharide)，由单糖聚合成聚合度大于10的极性大分子，分子量为数万至数百万，是构成生命活动的4大基本物质之一，与生命的多种生理功能密切相关。多糖是自然界含量最丰富的生物聚合物，几乎存在于所有生物体中。大量试验证明多糖具有抗病毒、增强免疫力、抗肿瘤、延缓衰老、降血糖、抗凝血等多种功效。玉米须多糖在玉米须中含量1～4%，是玉米须最主要的水溶性成分之一。多糖种类繁多，传统水体发是研究和应用的最多的一种方法。水体发可以用水煎煮提取，也可以用冷水浸提，本实验采用第一种提取方法。 多糖类遇浓硫酸被水解成单糖，单糖被浓硫酸脱水闭环，会形成糠醛类化合物。在浓硫酸存在下与α萘酚发生酚醛缩合反应，形成紫红色缩合物。故可用浓硫酸和α萘酚来鉴别多糖。 材料与方法 主要仪器与试剂 仪器：圆底烧瓶、冷凝管、烧杯2只、10ml、50 ml量筒各1个，滤布、滴管、玻璃棒、恒温槽、过滤装置一套、紫外分光光度计、25ml、50ml容量瓶各一个，洗耳球1只。 试剂：玉米须1.0g(干燥到恒重)、蒸馏水、浓硫酸、苯酚、α萘酚。 试验方法与步骤 提取多糖： 取玉米须柱头1.0g放入圆底烧瓶中，以1:20为料液比，用蒸馏水于90℃水浴内提取1h。过滤，并将所得滤液于50ml容量瓶中定容。 鉴别多糖： α萘酚试验 取检样品的水溶液1ml，加入5%萘酚试剂液数滴振摇后，沿管壁滴入5-6滴浓硫酸，变成两液层，待2-3min后，两层液面出现紫红色环。 多糖类遇浓硫酸被水解成单糖，单糖被浓硫酸脱水闭环，形成糠醛类化合物。在浓硫酸存在下与α萘酚发生酚醛缩合反应，形成紫红色缩合物。 多糖含量测定： 从50ml容量瓶中取5ml滤液，定容于25ml容量瓶，摇匀，以25ml容量瓶中移液0.5ml至10ml具塞试管。加1ml15%苯酚、3.5ml浓硫酸。40℃下恒温水浴30min，自然冷却15min至室温，在490nm初测吸光度。在标准曲线上计算出浓度，最后计算出得率，同时精密吸取蒸馏水0.5ml，于10ml试具试管中，加入15%苯酚于1ml，迅速加入3.5ml浓硫酸，迅速摇匀，同法做空白在490nm波长处测定吸光度（A）值如下：y=0.038+5.91x.相关系数r=0.9499.在糖含量60-140ug/ml范围内吸光度和糖含量呈良好的线性关系。 实验记录 时间步骤现象1:40安装仪器，检查装置的气密性，将4组冷凝管串联起来--------2:15称取玉米须柱头1.0g，放入圆底烧瓶，加30ml水----------2：22把玉米须于90℃水浴内提取60min溶液变成棕黄色4:22将提取液过滤，然后将滤液置于50ml容量瓶中，定容--------4:45取溶液5ml，定容于25ml容量瓶，移取0.5ml于试管，加1ml 15%苯酚3.5ml 浓硫酸，40℃恒温水浴30min加入试剂后分层，回流后，溶液不分层，颜色呈黄色。4:56在50ml容量瓶取溶液1ml，加5%萘酚数滴，振荡，沿管壁滴5-6滴浓