_沙门菌的检验技术(集大yqm).ppt

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 此方法不鉴定伤寒沙门氏菌 * * * For dried active yeast,substitute LST for SC. 少数沙门氏菌在XLD上呈黄色，有或没有黑色中心。 * （3）斜面碱性（红色-）底部碱性（红色-）或无变化（橘红色）：表示无糖类发酵。而蛋白质则于有氧或厌氧条件下进行代谢产生氨，而使培养基呈碱性反应，如有氧与厌氧均发生蛋白质分解，则斜面与底部均呈碱性反应。 为使结果准确，应于接种培养18-24小时内观察结果，以确保糖类尚未用尽，且蛋白质分解之碱性终产物尚未产生。 培养基变黑 （4）三糖铁琼脂培养基中亦含有硫代硫酸钠 若微生物有硫化氢产生，会与亚铁离子作用生成不溶性硫化亚铁之沉淀，进而使培养基变黑。 肠杆菌科各属在三糖铁琼脂内的反应结果 斜面 底层 产气 硫化氢 可能的菌属和种 － ＋ ＋/－ ＋ 沙门氏菌属、弗劳地氏柠檬酸 杆菌、变形杆菌属、缓慢爱德 华氏菌 ＋ ＋ ＋/－ ＋ 沙门氏菌Ⅲ、弗劳地氏柠檬酸 杆菌、普通变形杆菌 － ＋ ＋ － 沙门氏菌属、大肠埃希氏菌、 蜂窝哈夫尼亚菌、摩根氏菌， 普罗菲登斯菌属 － ＋ － － 伤寒沙门氏菌，鸡沙门氏菌、 志贺氏菌属、大肠埃希氏菌、 蜂窝哈夫尼亚菌、摩根氏菌， 普罗菲登斯菌属 ＋ ＋ ＋/－ － 大肠埃希氏菌、肠杆菌属、克 雷伯氏菌属、沙雷氏菌属、弗 劳地氏柠檬酸杆菌 注：＋阳性；－阴性；＋/－ 多数阳性，少数阴性 肠杆菌科各属生化反应初步鉴别表 反应序号 硫化氢 （H2S） 靛基质 pH7.2尿素 氰化钾 （KCN） 赖氨酸脱羧酶 判定结果 A1 ＋ － － － ＋ 沙门氏菌属 A2 ＋ ＋ － － ＋ 沙门氏菌属（少见）缓慢爱 德华氏菌 A3 ＋ － ＋ ＋ － 弗劳地氏柠檬酸杆菌、奇异 变形杆菌 A4 ＋ ＋ ＋ ＋ － 普通变形杆菌 B1 － － － － － － － － ＋ － 沙门氏菌属、大肠埃希氏 菌、甲型副伤寒沙门氏菌 大肠埃希氏菌、志贺氏菌属 B2 － － ＋ ＋ － － － ＋ － 大肠埃希氏菌 大肠埃希氏菌、志贺氏菌属 B3 － － － － ＋/－ ＋ ＋ ＋ ＋ － 克雷伯氏菌族各属阴沟肠杆 菌、弗劳地氏柠檬酸杆菌 B4 － ＋ ＋/－ ＋ － 摩根氏菌，普罗菲登斯菌属 注1：三糖铁琼脂底层均产酸，不产气者可排除；斜面产酸与产气与否均不限。 注2：KCN和赖氨酸可选作其中一项，但不能判定结果时，仍需补做另一项。 注3：＋表示阳性；－表示阴性；＋/－表示多数阳性，少数阴性。 2、靛基质（吲哚）试验 阴性（液面黄）阳性（液面玫瑰红） 3、尿素酶试验 阴性（黄）阳性（红） 5、赖氨酸脱羧酶试验 对照 阳性（紫） 阴性（黄）  4、氰化钾试验 “浑浊”为“+” ONPG试验 阳性（黄） 空白 丙二酸盐试验 阳性（兰） 阴性（不变） 沙门氏菌O多价血清凝集试验 左为阳性 右为阴性对照 3/3 血清学试验结果 结果报告 凡血清学鉴定与生化反应均符合沙门氏菌者 报告：×××食品25g检出沙门氏菌 反之则报告：×××食品25g未检出沙门氏菌  出口食品沙门氏菌属（包括亚利桑那菌）检验方法  肉类、蛋品 缓冲胨水（BPW） 四硫磺酸盐煌绿（TTB） 亚硒酸盐胱氨酸（SC） 37 ℃ 4h or 20～24h 直接选择性增菌 亚硒酸盐胱氨酸（SC） 四硫磺酸盐煌绿（TTB） 37 ℃ 24± 2h BS DHL (亚利桑那菌琼脂) 前增菌 37 ℃ 24～48h TSI 赖氨酸脱羧酶 TSI 尿素酶 37 ℃ 24～48h 生化试验 血清学试验（“O”抗原，“Vi”抗原） 42 ℃ 20 ± 2h 37 ℃ 24～48h 结果判定 检验检疫行业标准 SN 0170－92   样品（20类）25g 225mL 乳糖肉汤（LB）or 胰酪胨大豆肉汤（ TSB）or 煌绿溶液 （BG）or 通用前增菌肉汤（UPB）or营养肉汤（NB）or 再造脱脂奶粉 or 四硫酸盐煌绿（TT） pH6.8±0.2 24±2 h 35℃ RV TT 43±0.2℃ or 35±2.0℃ 24±2h 24±2h 42±0.2℃ BS XLD HE 24±2h 35℃ TSI