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微生物样本采集的标准化与规范化.ppt
微生物样本采集的标准化与规范化 基本原则(一) 采集标本前局部应做好准备工作,标本必须直接采自病变部位。 尽可能在合适的时间采集。 例如:清晨的痰和尿液含菌量较多,因此是采集的最佳时间。了解感染性疾病的自然过程有助于决定采集何种标本及采集时间。 必要的免疫学知识对解释血清学结果十分有用。 应尽量采集足量的标本送实验室。 例如:成人的血培养标本每次宜采集10ml以上。 基本原则(二) 使用合适器械及运送容器很重要,所有标本都应使用无菌容器;棉拭子常与运送培养基配合使用,但棉拭子不宜用作厌氧菌培养。任何送厌氧培养的标本应做到在厌氧环境下运送。 培养标本尽可能在应用抗菌药物前采集,解释培养结果时也应考虑抗菌药物使用史。有些细菌如淋病奈瑟球菌、化脓性链球菌、流感嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟球菌等对抗菌药物非常敏感。 对送检标本有特殊要求时,应在化验单上清楚标明,或直接与实验室联系。 常见标本类型 血液、骨髓、脓液 痰、尿、便 胸水、腹水、脑脊液、胆汁、胰液 伤口:引流液、分泌物 病变组织:炎性组织、坏死组织、脓苔 特定部位穿刺液:胰腺周围、囊肿内部 中心静脉插管 体内留置各种引流管 1.血培养 疑为菌血症、败血症和脓毒血症的患者,一般在发热初期和发热高峰期采集,如已用抗菌药物治疗的患者,应在下次用药前采集。 厌氧瓶平均报阳时间快于需氧瓶 皮肤消毒剂: 推荐使用碘酊、次氯酸和洗必太或碘伏。 碘酊、次氯酸和洗必太的消毒效果要优于碘伏。 消毒剂需要有足够的作用时间以保证消毒效果(碘酊作用30s;碘伏作用1.5~2 min)。 洗必泰的作用时间和碘酊一样,但是没有过敏反应,因此不必擦去,但不能用于小于2个月的婴儿。 操作方法 以75%酒精消毒培养瓶胶塞,等待1分钟。消毒静脉穿刺部位:以碘酊拭子从穿刺中心开始向四周同心消毒,待干;以75%酒精脱碘;不要再接触穿刺部位;抽血8-10 毫升/次,注入培养瓶;直接在培养瓶上注明患者姓名、送检日期, 2小时内送检。 培养瓶消毒程序: 用75%酒精擦拭血培养瓶橡皮塞(不能用含碘消毒剂),作用60s。用无菌纱布或无菌棉签清除橡皮塞表面残余液体.然后注入血液。 采集次数 急性脓毒血症 10分钟内从不同部位抽血2-3次; 急性感染性心内膜炎 从不同部位抽血3次,每次相隔1-2小时; 亚急性感染性心内膜炎 从不同部位抽血3次,每次相隔15分钟以上,如果24小时内培养为阴性,则同上再抽血培养3次。 不明原因发热 从不同部位抽血2-3次,每次相隔1小时以上;如果24小时内培养为阴性,则同上再抽血培养2-3次。 2.呼吸道标本 下呼吸道标本 1)支气管肺泡灌洗液,支气管刷或液,气管吸出物(可避免正常菌群污染,应首选):将吸出物或洗液置入“U”形管中;将支气管刷置入有盐水的无菌容器中。标本量1毫升。≤2小时,室温,1次/天。 2)咯出痰 在护士或医师的指导下收集痰标本;让患者用水漱口以去除口腔粘膜表面的正常菌群;指导患者深咯,收集下呼吸道痰(不要鼻后液体)。留入无菌容器。≤2小时,室温,1次/天。 3)诱导痰 嘱患者刷牙(主要是牙龈和舌头)后用水漱口;使用喷雾器,让患者吸入3-10%的无菌盐水25毫升;将诱导出的痰液收集入洁净或无菌容器中。其它同前。 标本要求 最理想的标本为:≤10个鳞状细胞 / 100倍视野,≥25个多核白细胞。 标本最小量:细菌,1毫升;真菌,3-5毫升;分枝杆菌,5-10毫升。 结核杆菌检查标本留取 浓缩集菌法查抗酸杆菌:可嘱患者咯晨痰1-2口或更多于洁净干燥容器中。 结核菌培养:应停患者当晚抗结核药物一次,次晨咳痰1-2口送检。 上呼吸道: 1)口腔:用拭子去除损伤表面的分泌物或碎屑,弃去拭子;用另一拭子用力抹取损伤部位,不要接触正常组织。用拭子肉汤培养基运送,≤2小时,室温,1次/天,不鼓励采集表层组织标本检测细菌,应选用供活检的标本或用针抽吸出的标本。可检测放线菌及诺卡菌。 2)鼻:预先用无菌盐水湿润拭子,将拭子插入鼻孔2厘米;靠着鼻粘膜旋转拭子。≤2小时,室温,1次/天,前鼻部培养可用于检测葡萄球菌和链球菌携带者,可用鼻窥器。 3)鼻咽:经鼻轻柔插入拭子至后鼻咽部;缓慢旋转拭子5秒以吸附分泌物;取出拭子置入肉汤培养基或立刻送至细菌室。肉汤拭子≤2小时,室温;拭子:≤15分钟,室温,1次/天。 4)咽用压舌板压舌;用无菌拭子在后咽部、扁桃体和其它感染部位采集标本;怀疑白喉可用无菌拭子从患者病变部位假膜及其边缘取材立刻送检。肉汤拭子≤2小时,室温;拭子:≤1小时,室温,1次/天。 3. 尿 外尿道多寄居有正常菌群,故采集尿液时更应注意无菌操作,常用清洁中段尿作为送检标本。中段尿用于细菌培养,最好用晨尿。诊断泌尿系感染的细菌学标准一般为
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