CD40信号与TNF-α在单核细胞来源的树突状细胞表达趋化因子及受体与相关功能中的作用的分析.pdf

CD40信号和TN跏在单棱细胞来源的树突状细胞襄达趋化因7及萁受体和相关功能中的作用研究中文摘要 CD40信号和TNF．n在单核细胞来源的树突状细胞表达 趋化因子及其受体和相关功能中的作用研究 中文摘要 树突状细胞(DCs)是目前已知的机体内功能最强的专职性抗原提呈细胞(APC)， 可以摄取、加工和处理各种抗原物质，并将抗原信息提呈给T细胞，有效地激发初 始型T细胞，从而启动机体的免疫应答，而其它的APC则不具此特性。近年来DCs 正受到越来越多的重视，被认为在介导固有免疫和适应性免疫应答中起着关键作用。 DCs具有异质性，由多种群体组成，根据其不同的前体来源，可以将DCs分为 髓系和T淋巴系两大群体，目前用于制各肿瘤DCs疫苗的体内外实验和临床初步试 验多采用髓系DCs，可以由CD34+造血细胞和外周血单核细胞诱导分化获得。骨髓 中的DCs前体细胞在炎症因子的趋化下，由血液循环中迁移至外周非淋巴组织，成 为未成熟的DCs，此时DCs具有很强的抗原摄取能力。能有效地俘获入侵的病原体， 但一旦DCs提呈抗原后，就失去了加工提呈新抗原的能力，并上调共刺激分子和调 节趋化因子受体的表达，迅速通过淋巴管的内皮细胞，经输入淋巴管引流迁移至次 级淋巴器官，到达次级淋巴器官的T细胞区，DCs将抗原提呈给抗原特异性的T淋 巴细胞，从而激活静息状态的T细胞，T细胞活化并迁移至病灶进一步发挥其生物 学功能，这是一个相当复杂的过程。 自1987年发现第一个趋化因子——．Ⅱ．．8至今，已克隆出50多种趋化因子及21 种趋化园子受体，趋化因子家族成为目前最大的细胞因子亚家族，趋化因子，趋化因 子受体系统是DCs和T细胞游走的原动力。不同发育阶段与不同部位的DCs通过表 达不同的趋化因子及其受体而表现出不同的趋化性，并受特定分布的趋化因子调控 发生定向迁移。正是由于不同组织表达特定趋化因子对相应DCs受体的协调作用， 不同类型的DCs群体才能完成精确的定向迁移。 近年来，随着DCs在免疫系统中的作用El益受到重视，各种与DCs相关的肿瘤疫 苗也逐渐在恶性黑色素瘤、肾癌等肿瘤治疗中开始应用，并取得了一定的效果。树突 CIM0信号和n舶在掌核细胞柬饵的树突扶细胞表选趋化因子及其受体和相关功能中的作用研究中文摘要 状细胞疫苗是新一代的肿瘤疫苗，可提供更有效的特异性主动免疫，显示了其比“常 规”疫苗的明显的优越性。虽然树突状细胞在机体淋巴组织，血液内含量极少，但随 着树突状细胞的分离、鉴定，纯化，扩增技术的日臻完善，树突状细胞疫苗在抗肿 瘤免疫中的应用也日新月异地发展起来。但要使DCs疫苗真正成为临床上的肿瘤疫 苗，尚面临着其它许多的挑战，包括如何使DCs疫苗精确迁移至有效部位等都有待 深入探索。另外潜在的自身免疫反应也是一个不容忽视的阿题。因此DCs疫苗成为 真正意义上的“肿瘤疫苗”尚任重道远，还需深入进行一些基础研究。 第一部分体外实验研究了CD40信号和TNF-u在单核细胞来源的树突状细胞表 达的趋化因子及其受体和相关功能：通过分离人新鲜外周血培养并获得CDl4十单核 细胞来源的imDC，在体外与凋亡肿瘤细胞共育并联合激发型CIM0单克隆抗体5C11 在T细胞上的表达，免疫组织化学方法和Real-timePCR方法检测不同发育阶段的 1刺激的 的Mo．DCs能表达较多的DC．CKl， 因而Ag组的Mo．DCs上清更能有效地趋化静 息的T细胞，而5CIl刺激的Mo．DCs表达DC—CKI却相对较少。 第二部分体内实验研究了C040信号和TNF．“在单核细胞来源的树突状细胞表 达的趋化因子及其受体和相关功能：在第一部分工作的基础上，将体外制备的单核 鼠体内，用免疫组织化学的方法检测这几组Mo．DCs在荷瘤人源化SCID小鼠各个脏 Ⅱ CD40信号和TNF吨在单核细胞来源的树突状细胞表迭趋化园子及其受体和相关功能巾的作用研究中文摘要 信号激发的Mo．DCs在荷瘤小鼠体内优先迁移至瘤组织。 综上所述，本实验首次通过对5Cll和TNF—a刺激的单核细胞来源的树突状细 胞表达趋化因子及其受体在体内外迁移的实验研究．分析了对单核细胞来源的树突 状细胞受5Cll和TN[?-II刺激后在不