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CD63基因在小鼠围着床期子宫中的表达与调节.pdf

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CD63基因在小鼠围着床期子宫中的表达和调节 摘要 胚胎着床是一个复杂的过程,需要活化的胚泡与进入接受态的子宫内膜之间 建立联系。在啮齿类动物,着床过程启动后,子宫内膜基质细胞发生广泛的蜕膜 化,为接下来的胚胎及胎盘发育做准备。胚胎着床和子宫蜕膜化受到很多因素调 控,但具体的分子机理仍不清楚。我们实验室利用基因表达系列分析(SAGE) 技术发现,与非着床位点相比,CD63(CD63 antigen)基因在小鼠的着床位点显 著上调。 CD63属于四次跨膜蛋白超家族,在人黑色素瘤等多种肿瘤发展中起重要作 用,被称为肿瘤转移抑制因子。本实验利用原位杂交、实时定量RT-PCR、Western blot和荧光素酶活性分析等方法,研究了CD63基因在围着床期小鼠子宫中的表 达与调节。CD63的mRNA和蛋白水平在妊娠第5天子宫的着床位点均显著上调, 在随后第6.8天的蜕膜区,均可检测到明显的CD63mRNA表达信号。在假孕和 延迟着床的子宫中,检测不到CD63基因的表达,而在延迟激活子宫的着床位点, CD63基因的表达特异性增强,其表达模式与正常妊娠第5天着床位点处类似。 CD63 mRNA在小鼠妊娠第6.8天的蜕膜区表达,同时在人工诱导蜕膜化的小鼠 予宫中也能检测到CD63基因的杂交信号,实时定量RT-PCR也验证了此结果, 提示CD63基因可能在蜕膜化过程发挥作用。在切除卵巢的小鼠中,类固醇激素 。 对CD63在子宫内的表达没有影响。体外诱导蜕膜化中,CD63mRNA表达持续 上调。CD63基因启动子上存在转录因子C/EBP13反应元件,将含有CD63基因 启动子序列的报告载体转染体外培养的子宫内膜基质细胞和NIH一3T3细胞后, 通过荧光素酶活性分析,表明C/EBP13能够显著增加CD63基因的转录活性。 总之,CD63基因在小鼠围着床期子宫中的表达与胚胎着床过程密切相关, 并受活性胚泡的诱导。CD63基因在小鼠子宫基质细胞体外蜕膜化过程中表达上 调。此外,转录因子C/EBP8上调CD63基因的转录活性。 关键词:CD63;着床;蜕膜 CD63基因在小鼠围着床期子宫中的表达和调节 Abstract isa in the which Embryoimplantationcomplexprocess reciprocal interactionbetweenthe and uterusis implantation·competentblastocystreceptive essential.Aftertheestablishmenof stromalcells implantation,endometrial begin tO decidualizationforthe and undergo subsequentembryodevelopment anddecidualization are regulatedbY factors,but placentation.Implantation

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