香蕉穿孔线虫监测方法.docVIP

香蕉穿孔线虫监测（试行） 为规范香蕉穿孔线虫监测工作，及时发现新疫情，准确掌握疫情扩散、分布及发生动态，特制定本监测方法。本方法，适用于全省各地开展香蕉穿孔线虫监测。 1监测准备 收集当地天南星科、凤梨科、芭蕉科、香蕉、甘蔗等观赏植物和农作物的种植情况，以及香蕉穿孔线虫的发生历史和现状等有关资料，制定监测计划。 2 监测区域 2.1未发生区 重点监测高风险区域，包括曾发生过疫情的花卉生产、销售基地，境外引进天南星科、竹芋科、凤梨科、棕榈科和芭蕉科等观赏植物的集中销售场所和种植地区。主要监测是否传入香蕉穿孔线虫。 2.2发生区 重点监测发生疫情的花卉生产和销售基地。主要监测香蕉穿孔线虫的发生动态和扩散趋势。 3 监测范围 重点监测天南星科、竹芋科、凤梨科、棕榈科和芭蕉科等观赏植物种植区和销售场所。 4监测时期 寄主植物的生长期，一般全年都可进行监测。 5 监测工具 工具：铲、枝剪、砍刀、聚乙烯塑料袋、油性笔、标签、记录本等。 6 监测方法 6.1未发生区监测方法 6.1.1访问调查 向花卉生产经营者、乡镇农技人员等询问调查当地天南星科等花卉植物的种植和病虫害发生情况，特别是苗木来源和是否有香蕉穿孔线虫发生的症状，做好访问调查记录，分析是否存在香蕉穿孔线虫可疑发生区。对询问过程中发现的香蕉穿孔线虫可疑发生地区进行深入重点调查。 6.1.2踏查 对访问调查过程中发现的香蕉穿孔线虫可疑发生区和其他有代表性的花卉种植和销售地区进行踏查（目测观察）。在花卉生长期进行2-3次踏查，踏查数量一般应不少于种植面积（株数）的50%。如果发现症状，详细记录所发现的可疑症状（附表1），发病程度，出现的地点，表现症状的面积（株数），确定疑似发生区。 6.1.3定点调查 对踏查过程中发现的疑似发生区和其他高风险区域进行定点调查。用GPS确定需定点调查区域的地理位置，从苗期开始，在植物生长期采用5点取样法或随机取样法进行2次以上调查，统计疑似发病株率。结果记入附表1，同时，对疑似病株按照附录方法取样，进行室内检测鉴定。 6.1.4 经鉴定一旦发现确认新疫情，相应区域按发生区进行监测。 6.2发生区监测方法 6.2.1发生区范围监测 参照6.1各方法采取访问调查、踏查和定点调查。 6.2.2发生区发生动态监测 对发生区及其边界区域，每月调查一次，监测香蕉穿孔线虫的发生动态。 6.3 调查取样 对调查过程中发现的疑似病株和无明显症状的植物按照附录1的方法取样，填附表1并附上田间症状照片。 7 疫情诊断 7.1 现场诊断 在种植、销售场地，对香蕉穿孔线虫的寄主植物进行调查，观察其生长状况，对地上部分表现疑似症状的植株，采集其根部和根际介质（土壤）；若地上部无明显症状表现的，则随机抽取部分植株，观察其根部生长状况并采集根和根际介质（土壤），并根据附录的方法进行抽样送实验室检验，将现场检验抽样结果填入附表。 7.2 样品保存 采集的植物材料和生长介质样品放入聚乙烯塑料袋中，带回实验室分离，样品若不能及时分离，可将样品放在20℃～25℃的室内，将袋口打开透气，并注意保湿和避免阳光照射，样品保存时间不要超过1个月。 7.3 室内鉴定 按附录的方法分离样品中的线虫，采用形态学鉴定或分子生物学方法进行鉴定。鉴定有困难的，送省级植物检疫机构或其委托的科研教学单位鉴定。 8 监测记录 各监测点详细记录调查监测数据并填写附表1，将原始调查记录表连同相关照片、影像等资料妥善保存于县级植物检疫机构备查。 9 监测报告 县级植物检疫机构对辖区各监测点的监测结果进行整理汇总按要求上报。经鉴定确认发生新疫情时，应立即上报。  雌虫： 雄虫： 幼虫： A——整体 B——整体 M——侧区 C,D——头部 E,F——头部 G——头部顶面观 H——头部顶面观 I~K——尾部 L——尾部 N——侧区 雌虫： 雄虫： 附录1： 香蕉穿孔线虫形态、生物学特性及防治措施等 1 病原特征 香蕉穿孔线虫隶属于线虫门(Nematoda)、侧尾腺纲(Secernentea)、垫刃目(Tylenchida)、短体科(Pratylenchidae)、穿孔属(Radopholus Thorne, 1949)，学名Radopholus similes。 雌虫：虫体呈线形，从虫体中部向两端略渐变细；热杀死后，虫体直或稍向腹面弯。体环纹清楚；侧区有4条深浅、粗细均匀