酶工程及发酵工程-复习.docVIP

一、名词解释 1、酶工程：是利用酶的催化作用进行物质转化的技术，是将酶学理论与化工技术结合而形成的新技术，是借助工程学手段利用酶或细胞、细胞器的特定功能提供产品的一门科学。 2、固定化酶：通过物理或化学的方法，将酶束缚于水不溶载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用，反应后的酶可以回收重复使用。 3、固定化细胞：就是被限制自由移动的细胞，即细胞受到物理化学等因素约束或限制在一定的空间界限内，但细胞仍保留催化活性并具有能被反复或连续使用的活力。 4、盐溶与盐析：大多数蛋白类酶都溶于水，而且在低浓度的盐存在的条件下，酶的溶解度随盐浓度的升高而增加，这称为盐溶现象。在盐浓度达到某一界限后，酶的溶解度随盐浓度升高而降低，这称为盐析现象。 5、产酶动力学主要研究发酵过程中细胞产酶速率以及各种因素对产酶速率的影响规律，产酶动力学可以从整个发酵系统着眼，研究群体细胞的产酶速率以及其影响因素，称为宏观产酶动力学，也可以细胞内部着眼，研究细胞中酶合成速率及其影响因素，谓之微观产酶动力学。?mol的底物转化为产物的酶量为一个国际单位，即1IU。 15、酶的比活力：是指每毫克酶蛋白所含酶活力的单位数，用U·mg-1蛋白表示。是酶制剂的一个纯度指标，对同一种酶来说，比活力愈高，表明酶纯度愈高。 16、富集培养。生长因子。 DNA改组：DNA改组又称为有性PCR：是将一组密切相关的序列（进化上相关的DNA序列或曾筛选出的性能改进的突变序列）片段化，再通过重组创造新基因的方法。 二、简答题 1、试述诱导契合学说和中间产物学说 答：诱导契合学说为，酶的活性中心在结构上具柔性，底物接近活性中心时，可诱导酶蛋白构象发生变化，同时底物构象也发生变化。这样就使酶活性中心有关基因正确排列和定向，使酶与底物完全契合而结合成中间产物并引起底物发生反应。 中间产物学说即酶一般是通过其活性中心先与底物结合形成一个中间复合物，然后在分解成产物，并释放出酶 S + E → ES → P + E 底物 酶 中间产物 产物 2、什么是米氏常数？在酶学研究中有何意义？ 答：米氏常数即Km值。就是当酶促反应速度达到最大反应速度一半时的底物浓度。在酶学研究中的意义是：1）Km值是酶的特征常数之一，它一般只与酶的性质有关，而与酶的浓度无关，不同酶的Km值不同。2）如果一个酶有几种底物时，则对每一种底物，各有一个特定的Tm值，其中Km值最小的底物被称为该酶的最适底物或天然底物。Km值随不同底物而异的特性有助于判断酶的专一性，并有助于研究酶的活性中心。3）Km值可以近似地表示酶对底物亲和力的大小，Km值越小，说明达到最大反应速度一半时所需底物的浓度越小，则酶对底物的亲和力就越大，反之亦然。显然，最适底物或天然底物与酶的亲和力最大。4）Km值测出后，可利用米氏方程求出任意底物浓度时的反应速度，或任何反应速度下的底物浓度。5）Km值还受介质pH值及温度等实验条件的影响。因此，Km值作为常数只是对一定的底物、一定的pH值机一定的温度条件而言。 3、简述酶的基本特征，蛋白类酶的分类方法 ?答：酶的基本特征：强 ?按照酶催化作用的类型，将蛋白酶类分为六大类，氧化还原酶，转移酶，水解酶裂合酶，异构酶，合成酶酶的生产合成调节理论，包括操纵子，诱导作用，阻遏作用 1）操纵子在原核基因组中由几个功能相关的结构基因及其调控区组成的一个基因表达的协同单位①结构基因是决定某一多肽的DNA模板，可根据其上的碱基顺序转录出相应的RNA，然后再可通过核糖体转译出相应的酶 ?②启动子：能被依赖于DNA的RNA聚合酶所识别的碱基顺序，是RNA聚合酶的结合部位和转录起点? ③操纵基因：位于启动基因和结构基因之间的一段碱基顺序，是阻遏蛋白的结合位点，能通过与阻遏物相结合来决定结构基因的转录是否能进行? ④调节基因：用于编码组成型调节蛋白的基因，一般远离操纵子但在原核生物中可以位于操纵子旁边,编码调节蛋白。 2酶合成调节的类型：诱导和阻遏 诱导：凡能促进酶生物合成的现象。 ?阻遏：凡能阻碍酶生物合成的现象。 ①酶合成的诱导 ?组成酶（固有酶）：不依赖底物或底物结构类似物的存在而合成的酶。如：EMP途径的一些酶。 ?诱导酶：依赖于底物或底物结构类似物的存在而合成的酶。如：乳糖酶。 ?诱导物：促进诱导酶产生的物质。底物或结构类似物，如：如β-半乳糖苷酶的作用底物乳糖及其底物类似物异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导β-半乳糖苷酶的生物合成。酶生物合成的诱导作用?加入某些物质使酶的生物合成开始或加速进行的现象 ②?阻遏 ?分解代谢物阻遏：当微生物在含有两种能够分解底物的培养基中生长时，利用快的那种分解底物会阻