口腔扁平苔藓患者的唾液蛋白质组学初步的分析.pdf

±生苎兰!主堕墨 口腔扁平曹藓患者的唾液蛋白质组学初步研究 El腔扁平苔藓患者的唾液蛋白质组学初步研究 专业： 口腔临床医学 硕士生：杨灵澜 导师：程斌主任医师 摘 要 研究背景 lichen 口腔扁平苔藓(oral planus，OLP)是常见的El腔黏膜慢性炎症性疾病， 病因不明。OLP的主要病理特征是上皮下淋巴细胞浸润带、上皮内淋巴细胞增 多和基底细胞破坏。临床表现为病程迁延不愈，部分反复发作的病损可发展成为 口腔癌。当前，亟待解决的关键问题之一是如何选择合理的研究对象并结合更先 进的研究手段，以便更全面客观地阐明OLP的发病机理，进而为临床分型、个 体化诊治以及预后评估提供帮助。 蛋白质组学是近年迅速崛起的一门交叉学科，由表达蛋白质组学和细胞作图 蛋白质组学两大部分组成，用于分析组织、细胞和各种体液的蛋白表达以及蛋白 blot和 之间的相互作用。与传统的蛋白检测技术如免疫组织化学法、Western ELISA等相比，它能够更加全面准确地研究蛋白的表达和功能，是现今生命科学 领域重大和热点课题。近年来，蛋白质组学研究进展迅猛，相继建立了多种蛋白 质表达数据库，充分展示了其良好的应用前景。通过分析比较蛋白质表达图谱， 已经成功鉴定出多种肿瘤如肝癌、肺腺癌和淋巴瘤等组织的差异表达蛋白。这对 于明确疾病的发病机制、早期诊断、病情监测和治疗具有十分重大的意义；还可 以发现新的生物标记物和治疗靶点，对药物开发和临床个体化治疗都能起到极大 的促进作用。唾液、尿液和血液等各种体液含有丰富的蛋白且取材方便，因而尤 其适合进行蛋白质组学研究。由此可见，高通量的蛋白质组学研究技术必将成为 更全面深入研究OLP发生发展机理的理想平台。 中山丈荦碛士论文 口腔扁平首藓患者的唾液鹰白质组学初步研究 唾液既包含了血液中可以被常规检测到的所有蛋白、激素、抗体和其他分子 标记，还包括许多唾液腺分泌的蛋白质；此外，其黏膜渗出液组分还可能含有原 来存在或来源于黏膜上皮细胞及黏膜下组织的多种蛋白质。因而，唾液可以反映 口腔局部环境和全身生理和病理状况，现已被广泛用来进行流行病学和临床研 究，对阐明各种生理和病理机制起到了很好的推动作用。另一方面，唾液检测简 易快捷，安全无创，容易被患者接受，也更适合进行大样本的研究。正是基于唾 of Institute 液检测独到的优势，美国国立牙科和颅颌面研究科学院(National DemalandCraniofacialResearch，NDCR)的年度预算申请报告中提出创新性重 点研究计划——创立唾液诊断学，充分说明了唾液研究的重要性。此外，其它组 织、细胞和体液蛋白质组学研究计划的相继成功启动，启示我们同样可以利用该 技术研究OLP发病和演变规律。 dimensional 本研究中，我们运用双向电泳(two 助激光解吸附／离子化飞行时间质谱技术(matrix nlass offlight 情况，并与健康人群唾液蛋白表达进行比较，初步鉴定和分析了多种差异表达蛋 白，这对于进一步阐明发病机制、推动OLP的基础和临床研究具有十分积极的 意义。 研究目的 1．建立唾液蛋白2-DE和MALDI．TOF—MS研究体系； 2．分析OLP患者与正常人唾液蛋白质的2-DE图谱； 3．鉴定OLP患者与正常人唾液差异表达蛋白质，分析这些蛋白与OLP的关系。 研究方法 1．样本收集；收集6例OLP患者和6例正常对照组的静息全唾液，离心后收集 上清液，．800C冻存。 2．样本处理：同一批双向电泳的标本(包括同类型OLP和相应的对照样本)同