老年大鼠的空间学习记忆能力下降和海马背侧胆固醇含量增加有关.pdf

中文摘要 老年大鼠的空间学习记忆能力下降与海马背侧胆固 醇含量增加有关 摘 要 目的：随着老龄人口逐年增加，我国已经开始提前步入 老年社会。相对于青年人群来说，老年人的学习和记忆能力 都有不同程度地下降，因此导致老年人社会适应能力较低， 进而影响了其生活质量。人的记忆功能正常有赖于大脑边缘 系统中的海马结构和功能的完善，现在的研究认为啮齿类动 物海马功能失常也会表现为一定程度的空间记忆能力缺陷。 阿尔茨海默病(AD)是一种伴随着认知功能障碍的老 年痴呆病，到2005年已经影响到全世界1500多万老年人口， 随着老年人口的增加预计到2050年AD患者可能增加目前 的3倍。AD患者的一个重要临床表现就是记忆功能下降， 现在研究认为AD患者记忆功能下降与脑胆固醇代谢发生紊 乱有关。但是，不是所有的老年人都会患有AD，然而，几 乎所有的老年人都存在不同程度的记忆力下降，这种机能变 化的分子机制是什么?脑胆固醇代谢失调是否与老年群体 记忆力的下降有关?与空间学习记忆密切相关的海马背侧 脑胆固醇代谢情况是否与大脑组织相同?这些都值得我们 去探讨。 为此，我们通过MoHis水迷宫方法评价21月龄老年大 鼠空间记忆的变化，同时观察脑组织和海马组织胆固醇含量 及胆固醇代谢相关酶羟甲基戊二酸单酰CoA还原酶 ( A reductase， 3_hydroxy．3一methylglutaUlcoenzyme 中 文摘要 }玎ⅥG．CoAR) 而为理解记忆能力缺陷的机制和防治老年记忆力减退提供 一定的理论依据。 方法： 1实验动物分组及行为测试 将21月龄雌性SD大鼠20只和4月龄雌性SD大鼠20 只，同时进行Moms水迷宫训练。先给予3天适应性训练， 用秒表记录逃避潜伏期并淘汰不合格大鼠，合格的21月龄 和4月龄SD大鼠分别称为老年实验组和青年对照组。第4 天行为测试采用连续8次的探索试验，最后3次逃避潜伏期 的平均值作为评价大鼠空间学习记忆能力的指标。 2组织标本的获取及指标测定 行为训练完成后处死大鼠，迅速分离脑组织和海马背侧 组织，立即置液氮中，于一70℃低温冰箱保存，用于脑和海 马背侧组织总训刚A的提取及总胆固醇的测定。 2．1脑组织和海马背侧组织总胆固醇含量的测定：将脑组织 和海马背侧组织用氯仿／甲醇(2：lVⅣ)抽提，用胆固醇 氧化酶一比色法测定。用每100克组织中的胆固醇毫克数表 示(mg／1009)； 2．2训心A的定量：用异硫氰酸胍一步法提取脑组织总RNA 后，用0．actin作为内参照；海马背侧组织用Trizol试剂盒 提取海马背侧组织总RNA后，用GAPDH作为内参照。然 达量，用样品和其内参照的百分比值表示。 结果： 中 文摘要 1大鼠Morris水迷宫行为测试 经初筛，合格的老年实验组大鼠和青年对照组大鼠分别 年大鼠的空间学习记忆能力明显降低。 2大鼠脑组织总胆固醇含量 19．2±169．7 老年实验组脑组织总胆固醇的含量(13 m∥1009)较青年对照组(1113．1±157．3m∥1009)明显升高 (p0．05)。 3大鼠脑组织瑚ⅥG—CoARmRNA表达 删G—CoAR是胆固醇合成途径关键酶。老年实验组大 mRNA表达 4大鼠脑组织CYP46 CYP46是胆固醇羟化而代谢出脑的关键酶。老年实验组 高(pO．05)，说明21月龄老年实验组大鼠脑组织增加了胆 固醇．24S．羟化酶mRNA的转录，以加速脑胆固醇以24S．羟 基胆固醇的形式穿过血脑屏障向外周转移。 5大鼠海马背侧组织总胆固醇含量 21月龄老年实验组大鼠海马背侧组织总胆固醇的含量 (1101．2±57．4 142．9 m∥1009)明显升高(pO．05)。 6大鼠海马背侧组织}玎ⅥG—CoARmRNA表达 21月龄老年实验组大鼠海马背侧组织ⅧⅥ