力达霉素与博安霉素抗肿瘤活性的生物调节.pdf

中国协和医科大学博士论文 中文摘要 中文摘要 抗肿瘤药物的疗效不但与肿瘤细胞的敏感性有关．而且还与宿主体内的一些 生物因素有关。本研究通过趋化调节、抗粘附和降低肿瘤药物的毒性来研究抗肿 瘤抗生素博安霉素和力达霉素抗肿瘤活性的生物调节。 第一部分趋化肚f-MLP与博安霉素联合的抗肿瘤作用 博安霉素(boanmycin，BAM)是博来霉素的屯组份，临床研究表明对多种肿 瘤有效。趋化肚可吸引与激活白细胞(含巨噬细胞)，使其对肿瘤生长、侵袭与转 移过程产生一定的影响。fMLP(CHO-Met．1ie．Phe)是趋化肽的一种。本研究探讨 BAM和fMLP联合的抗肿瘤作用。 体外采用MTT法测定了BAM和fMLP联合对肿瘤细胞的细胞毒作用，尤其 是巨噬细胞存在时的作用。结果表明，BAM与IMLP联合对肿瘤细胞没有协同作 用，但BAM u u 10ug／ml、30g／ml和100g／ml与fMLP20itg／ml联合在加入巨噬 细胞后对肿瘤细胞有显著协同作用。 体外初步观察了BAM和IMLP联台在巨噬细胞存在时对肿瘤细胞的细胞毒有 协同作用的机制。这种机制是以fMLP对巨噬细胞的基本作用(刺激巨噬细胞产生 超氧阴离子自由基、NO和IL．6等)为基础展开研究。以NBT法观察了fMLP刺 激BAM在体外处理的巨噬细胞产生超氧阴离子自由基情况。结果为，fMLP(4．6x10。 mol／L)爿ilJ激BAM1¨咖I、10lag／ml和100gg／ml体外处理的巨噬细胞产生超氧阴 离子自由基显著增加：阳性率由对照的24，44-6．6分别上升到62，0±9．4、57．2±7．4． 和48．8±10．0(P0．01)：IMLP(4．6x107mol／L)牵U激博安霉素体内处理的巨噬细胞 产生超氧阴离子自由基的情况。结果为，fMLP(4．6×104 1 mol／L)牵lJ激BAMmg／kg、 3mg／kg和10mg／kg体外处理的巨噬细胞产生超氧阴离子自由基显著增加：阳性率 由fMLP组的20．0±5．5分别上升到91．6±0．76、887±3．3和84．0±7．0(P0．01)。 NO在体外很快变为亚硝酸盐(N02。)，以Griess法测定N02．的含量可间接反 映NO的含量。药物与小鼠腹腔细胞孵温24h．fMLP2．3gmol／L未能使小鼠腹腔 细胞释放NO的量增加，但刺激BAM 10“∥ml、100¨咖l处理的小鼠腹腔细胞释 以RT-PCR法观察fMLP对BAM体外处理的巨噬细胞表达lL-6mRNA的影响。 结果为．tMLP2．3 h．可使IL-6mRNA的表达比对照显 p．mol／L与巨噬细胞孵温5 著增加；分别与BAM mRNA的表达比对照 1儿g／ml、10rtg／ml合用，未能使IL-6 中国协和医科大学博士论文 中文摘要 显著增加。 体外观察了fMLP对BAM处理的巨噬细胞的趋化作用。结果为，巨噬细胞以 BAM处理4．5小时，同时以tMLP趋化，fMLP对较低浓度的BAM处理的巨噬细 胞有较好的趋化作用。BAM从腹腔给予动物，3天后取出腹腔巨噬细胞。 fMLP(4．6x10。mol／L)曼JBAM1mg／kg处理的巨噬细胞有较好的趋化作用，与对照 相比，有显著差异。PO．05。总之，fMLP对BAM处理的巨噬细胞的仍保持了较 好的趋化作用 体内实验以小鼠移植性肝癌H22模型观察BAM和fMLP联合抗肿瘤作用。 fMLP lmg／mouse为瘤周给药×3．tMLP无显著抗肿瘤作用。BAM和fMLP同时台 用时设计了3个实验：(11肿瘤接种后24h开始治疗．BAM为瘤周给药×3，BAM 0．5 0．36，有显著协同作用。(2)肿瘤接种后24h开始治疗，BAM为腹腔给药×3，BAM 1 mg／kg组肿瘤生长较快，合用f-MLP后生长缓慢。在14天BAM