利用PDGF-BB与VEGF活化脱钙骨基质分析.pdf

内 容 摘 要 功能生物材料是指能主动对机体的理化或生理过程产生影响而实现组织再生 的生物活性材料。脱钙骨基质（Demineralized bone matrix ，DBM ）是一种应用广泛 的生物材料，而生长因子具有促进细胞增殖、迁移及分化的作用，所以经常被用来 活化材料。然而，生长因子与DBM 的简单吸附不利于生长因子在损伤部位发挥作 用。因此，我们设想用肝素介导法和直接交联法，分别将血管内皮生长因子（Vascular endothelial growth factor ，VEGF ）和血小板源生长因子（Platelet derived growth factor-BB，PDGF-BB ）两种生长因子定向地锚定到DBM 上，使之形成功能生物材 料，就有可以实现组织的再生，从而达到定向修复组织损伤的目的。 向肝素化的 DBM （HC-DBM ）上滴加 VEGF ，然后包埋在大鼠皮下，以实现 材料的细胞化和血管化。实验证实，与天然的DBM 相比，HC-DBM 吸附VEGF 的 能力明显增强，而且能实现VEGF 的持续和定位释放。体外活性实验也证实，结合 到肝素化DBM 上的VEGF 的生物学活性也未受到影响。材料的活化在大鼠的皮下 包埋实验中进一步得到了证实。通过H.E. 染色和免疫组化染色，DBM 的生物学活 性明显被VEGF 增强，这一实验说明，通过肝素介导的VEGF 能有效的活化DBM ， 为进一步的组织定向修复提供一个有效的途径。 通过直接化学交联的方法，将PDGF-BB 交联到DBM 上以达到活化DBM 的目 的。实验检验证实，交联到DBM 上的PDGF-BB 的量比自然吸附明显提高，同时 体外活性检测也证实了化学交联后 PDGF-BB 的活性没有受到影响。将交联有 PDGF-BB 的DBM 包埋到大鼠皮下，分别取7d 和 14d 两个时间点检测材料的细胞 化和血管化的程度。经过证实，在这两个时间点，交联有PDGF-BB 组的材料的细 胞化和血管化程度明显比自然吸附组和空白对照组要高。从以上结果证实，直接交 联的方法不仅能提高材料结合因子的量，而且能明显提高材料的表面活性。 关键词：DBM PDGF-BB VEGF 细胞化和血管化 组织修复 II Abstract Functional biomaterials are bioactive materials which could affect biochemical and/or physiological process to promote tissue regenerations. Growth factors have been utilized to activate collagen biomaterials for their specific roles in promoting cell proliferation, movement and differentiation. However, simple absorption of growth factors to demineralized bone matrix (DBM) results limited repair effects for their rapid diffusion in vivo. In our study, we employed two methods, haperin mediating and direct chemical crosslinking, to immobilize VEGF and PDGF-BB on DBM respectively, which could promote tissue regenerations on implanted DBM. Heparin-crosslinked demineralized bon