连续培养下细菌生物膜模型的建立及其头孢他啶对生物膜细菌的作用.pdf

垄鐾生鲞!塑堕兰望堕堡型堕堡立墨兰丝丝堕堕生塑壁塑堕盟笪旦——————一 中文摘要 第一部分 连续培养下细菌生物膜模型的建立 f近年来，随着医学和生物材料科学的发展，侵入性检查和治疗措施及人造 器官的应用日．趋f援二．与之担伴随的感染问题也曰益突出。一连些感染太多；i缈 f菌生物膜(Biofilm，BFI)的形成有关。某些慢性感染如肺囊性纤维化、弥漫性 泛支气管炎等也与BF的形成密切相关。目前认为细菌BF的形成是许多慢性持 cells) cells)与浮游菌(Planktonic 续性细菌感染存在的重要原因。BF细菌(Sessile 在形态结构、生理、生化特性等方面具有很大差异，尤其是形成BF的细菌对 抗菌药物的耐药性显著高于浮游菌，因此研究细菌BF的功能，探寻对细菌BF 的防治方法是非常必要的。 建立细菌‘BF的体外模型是研究BF必不可少的工具。选择一个合适的模型 系统，不仅要考虑技术上的限制和体内BF形成的真实情况，而且要考虑在细 菌BF形成的试验过程中可能会影响最终结果的所有生理过程。J本研究用处于 ＼。对数生长期的铜绿假单胞菌并采用细菌连续培养装置(恒化器)结合Robbins 装置在载玻片工建立96h细菌@体外模型。用扫描电镜(SEM)和激光共聚 定所形成的BF厚度并用平板计数法计数BF内的活细菌数。f三次试验(n=7)测 分析表明三次试验BF内活菌数差别无统计学意义(po．05)J气式验证明恒化器 结合Robbins装置建立细菌BF体外模型具有良好的重复性，所形成的成熟BF 的厚度及BF内的活菌数相对稳定，是建立BF体外模型的良好方法。 2 连续培莽下细菌生物膜模型的建立及头孢他啶对生趁堕细堕盟堡旦 第二部分 头孢他啶对生物膜细菌的作用 细菌生物膜(Bio矗lm，BF)的形成是慢性持续性感染存在的重要原因之～， 由于BF细菌和浮游菌的生物学特性不同，BF细菌对抗菌药物的耐药性明显高 f其相应的浮游菌(Planktoniccells)，并且可以逃避机体的免疫清除作用，同 时可以通过自身免疫反应使机体受到损伤，因此临床上与BF相关感染的治疗 1#常困难。目前抗菌药物仍然是治疗BF相关感染的重要手段之一。许多研究 资料表明BF细菌对抗菌药物的敏感性低于其相应的浮游菌，且不同时期的BF 细菌对抗菌药物的敏感性也不同：但也有研究不同意这一观点，认为BF细菌 Planktonic 和稳定期浮游菌(Stationaryceils)对抗菌药物具有相同的敏感性。 通常所认为的BF细菌对抗菌药物的敏感性低于浮游菌是由于用BF细菌与快速 cells)相比较而得的结果。因心本 佳跃期浮游菌(109arithmic-phaseplanktonic 研究通过恒化器结合改良Robbins装置建立铜绿假单胞菌BF体外模型，应用对 稳定期铜绿假单胞菌有抑制作用的头孢他啶(复达欣)浓度(64mg／L)作用了二 sEM)从形态学角度观察头孢他啶对早期和成熟期铜绿假单胞菌BF的作用效 果，并用统计学方法分析头孢他啶作用于不同时期铜绿假单胞菌BF后，BF内 活菌数的变化。试验结果显示早期BF内铜绿假单胞菌经头孢他啶作用后基本 被清除，而成熟期BF内的铜绿假单胞菌仍大量存在。试验证明成熟期BF内的 铜绿假单胞菌对抗菌药物的抵抗性高于稳定期铜绿假单胞菌浮游菌，并且成熟 期BF比早期BF对抗菌药物具有更高的抵抗性。 关键词： 生物膜 恒化器 头孢他啶 ／7 ’-。 细菌7 感染 耐药 铜绿假单胞菌 堡堡堡茎互塑堕竺塑壁攫型塑堡!：墨苎丝丝堕翌兰塑竖型堕堕笪旦——————一