抗菌肽基因Gnk2-1经花粉管通道法导入西瓜的初步研究.doc

园 艺 学 报 2014，41（7）：1467–1475 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 收稿日期：2014–04–20；修回日期：2014–06–03 基金项目：国家自然科学基金项目 * 通信作者 Author for correspondence（E-mail：zhangxian098@126.com） 抗菌肽基因 Gnk2-1 经花粉管通道法导入西瓜的 初步研究 许珺然，张 显*，张 勇，马建祥 （西北农林科技大学园艺学院，陕西杨凌 712100） 摘 要：通过花粉管通道介导银杏抗菌肽基因 Gnk2-1 于西瓜自交系‘04-1-2’中，以浓度为100、200、 300和400 ng · μL-1的DNA为供体，分别于授粉后24、27、30和33 h导入，对子代进行PCR检测。结 果表明：T0代坐果率和单瓜结籽数随授粉后处理时间的增加而升高，但在各个处理时间下均显著低于对 照；外源DNA的导入对授粉后27 h处理的T1代种子发芽率和授粉后24 h处理的T1代种子出苗率均造成 显著降低；不同DNA浓度转化的T1代种子的发芽率和出苗率与对照相比差异不显著；对1 280株T1幼 苗进行PCR检测，得到32株阳性转化植株，总体转化率为2.5%，最佳转化时间为授粉后24 ~ 27 h，最佳 DNA转化浓度为100 ~ 200 ng · μL-1；PCR阳性植株抗病鉴定表明转基因植株对西瓜枯萎病的抗性有所增强。 关键词：西瓜；花粉管通道法；分子检测；抗菌肽 中图分类号：S 651 文献标志码：A 文章编号：0513-353X（2014）07-1467-09 Introduction of Antimicrobial Peptide Gene Gnk2-1 into Watermelon via Pollen-tube Pathway XU Jun-ran，ZHANG Xian*，ZHANG Yong，and MA Jian-xiang （ College of Horticulture ， Northwest A F University ， Yangling ， Shaanxi 712100， China ） Abstract：In order to study the feasibility of transferring exogenous DNA into watermelon by pollen-tube pathway，the antimicrobial peptide gene Gnk2-1 was introduced into watermelon accession ‘04-1-2’by pollen-tube pathway with different concentration（100，200，300 and 400 ng · μL-1）at different time（24 h，27 h，30 h，33 h）after self-pollination. Seeds from treated fruits were harvested and tested by PCR. The results were as follows：The fruit setting rate and average number of seeds of T0 generation increased with the increment of treatment time after self-pollination，though the two figures both showed a significant decrease under all treatments compared with control. The germination rate of T1 seeds treated 27 h after self-pollination and the seedling emergence rate of T1 seeds treated 24 h after self-pollination decreased significantly. Compared with c