新型复合菌制剂对发酵床养猪饲料氮及氨基酸消化的影响.doc

新型复合菌制剂对发酵床养猪饲料氮及氨基酸消化的影响 ????近年来，随着科技的进步和生产力的发展，我国的养猪业逐步进入集约化、规模化、产业化为主的生产模式。然而“集约化、工厂化”养殖方式尽管生产效率高，但面临着粪污处理的难题，缺乏行之有效的处理方式，环保压力增大。虽然目前一些饲养场将排泄物应用于“生态农业循环链”中，但粪便处理的成本加大，同时“集约化”生产导致猪发病率的增加‘3]。发酵床是基于畜禽粪便排放与环境污染控制的一种健康的养殖方式，符合动物福利和低碳减排的要求，实现了无污染、“零”排放的目的，改善了猪的福利，提高了生产性能，降低养殖成本，减少消化道疾病的发生和抗生素等药物的使用[4-5]。Philippe等研究证实发酵床养猪过程释放出来的C02、CH4、N20等温室气体及有害气体明显低于传统水泥圈舍养猪的释放量；Schembri等对澳大利亚使用发酵床与固体地面相结合的方式养猪全生命周期进行跟踪评价，阐述发酵床圈舍对幼猪、断乳猪及生长猪生长状况、饲料利用率均起到显著的促进效果。近年来，尽管国内有很多地区开展发酵床养猪技术示范及相关研究，但面临菌种及垫料成本投入较大以及生物安全等诸多亟待解决的瓶颈问题。目前，生态发酵床菌种的筛选及混合不同属种益生菌制剂的功能研究是一个热点。关于发酵床益生菌制剂对猪生长期饲料氨基酸利用率的影响报道很少。本试验通过自行筛选研制的复合菌种及商业单一菌种制备发酵床进行猪生长期饲养试验，探讨不同类型益生菌制剂对发酵床饲养猪生长期氨基酸消化利用的效果。以期为发酵床生态养猪生产实践中利用理想氨基酸配制低蛋白日粮，在不降低生产性能的前提下，降低氮的污染提供理论依据和参考。 1??材料与方法 1.1试验材料 ????本试验制作发酵床所使用的菌种分为3类，一类是自行筛选制备的复合菌种(JDM)，主要由枯草芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌、光合细菌等菌种构成；第二类是商业菌种(SHC)，是一种以枯草芽孢杆菌为主，为相对较为单一的菌种；第三种是商业洛东菌素(GLD)，主要是以纳豆菌为主所构成的菌种。3类菌种的活菌数均≥10.5×10loCFU/g。 1.2发酵床的制作 ????本试验圈舍发酵床采用地上床面设计，发酵床面厚度为60 cm。发酵床垫料采用锯末、稻壳、谷壳及细稻草秸秆作为主要成分，制作时将不同类型菌种喷洒在垫料上面，加入适量泥土和食盐，然后喷洒适量水并人工翻转搅拌，自然发酵7～10 d即可用于猪生长期饲养试验。饲养过程中，除随时翻转部分板结区域外，每半个月翻转一次垫料床，定期补加垫料和菌种。 1.3试验基础日粮及营养水平 ????基础日粮及营养水平参照中国瘦肉型猪饲养标准和NRC标准配制，仔猪生长阶段体重为20～50kg，基础日粮组成及营养水平见表1。 1.4试验动物及分组 ????选用60头日龄、胎次相近，体重在20 kg左右杜×长×大三元杂交猪，公母比例相近，分为3个不同来源菌种发酵床饲养组(JDM、SHC、GLD)和1个对照组(CON)，饲喂基础日粮，饲养试验期为30d，其中预试期7d。 1.5饲养管理 ????本试验场地为上海松林畜禽养殖专业合作社田黄种养结合家庭农场试验猪场（图1），试验按照猪场常规饲养管理进行，试验猪自由采食和饮水，记录猪的采食量，观察猪的采食情况及健康状况。 1.6样品的采集及测试分析 1.6.1??样品中氮含量测试分析 ????由于发酵床养猪无法收集全粪便及尿液，因此采用外源指示剂法来测定饲料氮和氨基酸的表观消化率。在饲粮中添加0.5%三氧化二铬作为外源指示剂，于饲养试验开始后第8天开始，预饲7d后每隔2d采样，每次采样每组随机选择6头猪，每日定时收集粪便，每次收取的粪样及时装入准备好的塑料袋中，同时滴数滴甲苯，以防止微生物的作用，置于--20℃冰箱保存。试验结束后，同一头猪所有粪样混合拌匀后，取样样品置65℃烘箱干燥、回潮后测定粪样风干物质百分含量。利用常规“凯氏定氮法”测定粪中氮含量，利用原子吸收光谱进行饲料与粪样中的铬含量测定，计算粪氮排泄量。1.6.2样品中氨基酸含量测试分析 ????样品中氨基酸含量测试分析在吉林农业大学分析测试中心进行，采用日立L-800型氨基酸分析仪测定。准备称取样品置于水解管中，精确到0.0001g，称样量在lOOmg左右，平行样3个；在水解管内加6．O mol/I。盐酸15.00 mI。，1%巯基乙酸1.00mI。，盖上胶塞，用真空泵抽至真空，将此水解管封口后置于110±1℃的恒温干燥箱内水解22 h，水解结束后将水解液过滤并转移至50.00 mI。容量瓶并定容。吸取滤液1.00 mL于25 mL烧杯内，蒸干，再用1～2 mL水溶解后再蒸干，重复2次，最后残留物用0.02 mol/L盐酸1.00 mL溶解，经0.22_um滤膜过滤后上机测定。分析