三株O型口蹄疫病毒单克隆抗体的抗原识别位点分析.pdf

维普资讯 中国兽 医科学 2008，38(09)：747—752 ChineseVeterinaryScience 中图分类号：S852．659．6 文献标识码 ：A 文章编号 ：l6734696(2008)09—0747—06 三株 。型 口蹄疫病毒单克隆抗体的抗原识别位点分析 宋 帅 ，林 彤 ，邵军军 ，丛国正 ，独军政 ，常惠芸 ，胡永浩 (1．中国农业科学院 兰州兽医研究所 家畜疫病病原生物学国家重点实验室 农业部畜禽 病毒学重点开放实验室 国家 口蹄疫参考实验室，甘肃 兰州 730046； 2．甘肃农业大学 动物医学院，甘肃 兰州 730070) 摘要：用抗 ()型 口蹄疫病毒(FMDV)单克隆抗体杂交瘤细胞株 (4A9、4C3、9F12)制备腹水并进行纯化， 经 EIISA 检测 ，单抗 4A9、4C3和 9F12的腹水效价分别为 1：25600、1：102400和 1：512OO，SDS—PAGE 分析显示，3株纯化单抗均以IgG重链和轻链为主，其分子质量分别约为45ku和 25ku。单抗 4A9、4C3和 9F12的饱和度分别为 1：4O、1：4O和 1：1000，叠加试验所得增值指数分别为 0．27 、13．O5 、l3．34 ， 均小于50 。Westernblotting结果显示，3株单抗均可与 ()型FMDV结构蛋白VP1发生特异性反应。表 明，此3株单抗均识别 ()型 FMDVVP1蛋白上的同一个抗原位点，存在干扰现象。 关键词 ：O型口蹄疫病毒；单克隆抗体；抗原位点 Analysisoftheantigenicepitoperecognizedbythreemonoclonal antibodiesagainstfoot-。and-。mouthdiseasevirustypeO SONG Shuai’，IINTong ，SHAOJun—jun ，CONGGuo—zheng ，DUJun—zheng ， CHANG Hui—yun ，HU Yong—hao。 (1．NationalFoot—and—MouthDiseaseReferentLaborator3’／KeyLaboratoryofAnimalVirologyoftheMinistryof Agr“tnurefStulcKeyLaboratoryofVeterinaryEtiologicalBiology／LanzhouVeterinaryResearthInstitute， ChineseA(ademyofAgri~’ulturalSciences，Lanzhou730046，China；2．CollegeofVeterinaryMedicine， GansuAgriculturalUniversity，Lanzhou730070，China) Abstract：Themurineascitesof3monoclonalantibodies(4A9，4C3and9F12)againstfoot—and—mouth diseasevirus(FMDV)typeO wereproducedandpurified．Thetitersintheascites(4A9。4C3and9F12)of themice，detectedbyEIISA ，were1：25600，1：102400and1：51200，respectivelY．SDS—PAGE ariaJyses showedthatIgG heavychainsandlightchainsofthe3monoclonalantibodieswereapproximately45kuand 25kuinmolecularmass，respectively．Thesaturationdegreesofthe3monoclonalantibodies(4A9．4C3and 9F12)were1：40，1：40and l：1000，respectively．Theirincrementindex，detectedbycompet