杧果Rab蛋白基因MiRab11的克隆及表达分析.doc

园 艺 学 报 2014，41（7）：1335–1343 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 收稿日期：2014–03–28；修回日期：2014–06–05 基金项目：广西自然科学基金重点项目（2013GXNSFDA019011）；广西自然科学基金项目（2011GXNSFA018115） * 共同第一作者 ** 通信作者 Author for correspondence（E-mail：honest66222@163.com） 杧果Rab蛋白基因 MiRab11 的克隆及表达分析 刘召亮1,*，罗 聪1,*，董 龙1，何新华1,2,**，艮文全1，李丽淑1，韦鹏霄1 （1广西大学农学院，南宁 530004；2广西农业科学院，广西作物遗传改良生物技术重点开放实验室，南宁 530007） 摘 要：根据前期对杧果（ Mangifera indica L.）胁迫差异分析中获得的 Rab11 片段，采用RT-PCR 结合RACE技术，从‘四季杧’混合组织材料（叶、茎、花和果实）中克隆了一个 Rab11 完整编码区序 列，命名为 MiRab11 。其cDNA全长902 bp，包含完整开放阅读框657 bp，编码218个氨基酸。同源性 分析表明 MiRab11 与葡萄和柑橘的同源性最高（相似度均为97%）。实时荧光定量检测结果表明： MiRab11 在杧果叶、茎、花和果实中均有表达，在嫩茎和花后70 d的成熟果实中的表达较高；在果实形成及发育 初期表达量略有下调，但在果实成熟过程中表达量明显上调；逆境胁迫（低温、盐、干旱）处理可引起 在叶或茎中上调表达；不同信号物质（脱落酸、水杨酸、双氧水）刺激均可引起叶中的表达上调。结果 表明， MiRab11 可能在杧果果实成熟和胁迫反应中发挥重要作用。 关键词：杧果； MiRab11 ；克隆；表达分析 中图分类号：S 667.7 文献标志码：A 文章编号：0513-353X（2014）07-1335-09 Cloning and Expression Analysis of a GTP-binding Protein MiRab11 Gene from Mangifera indica LIU Zhao-liang1,*，LUO Cong1,*，DONG Long1，HE Xin-hua1,2,**，CAN Van Toan1，LI Li-shu1，and WEI Peng-xiao1 （1 College of Agriculture ， Guangxi University ， Nanning 530004， China ；2 Guangxi Crop Genetic Improvement and Biotechnology Key Laboratory ， Nanning 530007， China ） Abstract：A MiRab11 gene，which belonged to small GTP-binding proteins Rab gene family，was cloned by RT-PCR and RACE from Mangifera indica mixed tissues（leaves，stems，flowers，and fruits）. The full-length cDNA sequence was 902 bp and contained an open reading frame of 654 bp，which encoded a 218 amino acid protein. The deduced amino acid sequence exhibited high homology with Vitis vinifera and Citrus sinensis （97% similarity）. Real-time quantitative PCR detection showed that the ubiquitously expressed MiRab11 in young stems and fruit of 70 d after flowering was much higher than in other